李红卫,王开萍,吴　娱,唐正江,汤　飞,刘国庆,2

(1.合肥工业大学 生物与食品工程学院,安徽 合肥　230009;2.安徽省皖江禽产业研究院，安徽 宣城　242000)



猪肌肉组织中碱性磷酸酶的纯化及特性研究

李红卫1,王开萍1,吴娱1,唐正江1,汤飞1,刘国庆1,2

(1.合肥工业大学 生物与食品工程学院,安徽 合肥230009;2.安徽省皖江禽产业研究院，安徽 宣城242000)

摘要:猪肌肉组织中碱性磷酸酶经预冷的正丁醇提取、硫酸铵分级沉淀、DEAE-52纤维素离子交换柱层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析得到碱性磷酸酶。纯化倍数为57.34,比活力为28.77 U/mg。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)分析可得该酶的分子质量为66 kDa。该酶催化底物对硝基苯磷酸二钠(p-NPP)的最适pH值为9.7,最适温度为30℃，Mg2+和Ca2+对其有激活作用,Zn2+和EDTA对其有抑制作用。

关键词:猪肌肉组织;碱性磷酸酶;分离纯化

碱性磷酸酶(AKP)是一种同源二聚体的糖蛋白,该酶属于磷酸酶,在碱性条件下(最适pH值为10左右)能够通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,产生无机磷酸和对应的醇、酚或糖。AKP不仅参与钙磷代谢,维持体内适宜的钙磷比例,而且还与蛋白的分泌与合成相关,在生物体的物质代谢中具有重要作用[1-2]。近年来,很多研究者从不同动物组织中分离纯化出了碱性磷酸酶[3-5],并对其性质做了大量的研究。文献[6]从鸡肝中分离纯化了鸡肝碱性磷酸酶,以对硝基苯磷酸二钠(p-NPP)为底物,测得该酶的最适pH值为10.5,最适温度为40℃。甲醇、乙二醇与丙三醇均对其活性有不同程度的抑制作用。文献[7]从鸭肝中分离纯化出电泳纯的碱性磷酸酶,该酶纯化倍数达58.3倍,比活力为337.4 U/mg。……