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重组枯草芽孢杆菌发酵产青霉素G酰化酶的条件优化

2016-06-16吴卓颖邵威平张永玲杨富民田常庆

甘肃农业大学学报 2016年2期

吴卓颖,邵威平,张永玲,杨富民,田常庆

(1.甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃 兰州 730070;2.临夏州人民医院,甘肃 临夏 731100;3.甘肃农业大学生命科学技术学院,甘肃 兰州 730070)



重组枯草芽孢杆菌发酵产青霉素G酰化酶的条件优化

吴卓颖1,邵威平1,张永玲2,杨富民1,田常庆3

(1.甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃 兰州730070;2.临夏州人民医院,甘肃 临夏731100;3.甘肃农业大学生命科学技术学院,甘肃 兰州730070)

摘要:【目的】研究提高PGA酶活力及稳定性.【方法】 以重组枯草芽孢杆菌10397(pMA5-PGA)产PGA酶活力为研究对象,在单因素试验基础上,采用响应面设计,对重组菌发酵产PGA的培养基及发酵条件进行了研究.【结果】 以葡萄糖20.39 g/L、胰蛋白胨15.48 g/L、糊精6.1 g/L为培养基,在三角瓶装液量16.23%、接种量4.32%、温度35.43 ℃、时间48.34 h、摇床转速220 r/min的条件下,所产PGA的酶活力为14.167 U/mL,比初始发酵条件下发酵重组菌产PGA的酶活提高了1.14倍.【结论】 通过条件优化,可提高重组枯草芽孢杆菌PGA的酶活力,并为工业化生产PGA提供科学依据.

关键词:重组枯草芽孢杆菌;发酵;青霉素G酰化酶;工艺优化

青霉素G酰化酶(Penicillin G Acylase,简称PGA)是一种重要的工业用酶,不仅可以催化青霉素水解生产6-APA和7-ADCA,还能催化6-APA、7-ADCA与侧链化合物缩合生成各种高效的半合成类抗生素[1-2].并且,作为关键的生物催化剂,PGA在许多具有潜在价值的反应中也发挥着重要作用[3].

目前关于PGA的研究,在分离提纯、PGA菌种筛选、构建重组工程菌等方面已经取得了一定进展,但对产酶菌种的最适发酵条件、产酶活性与稳定性、工程菌的高效表达……

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