管氏肿腿蜂感染Wolbachia的分子检测
2016-06-04黄镜梅刘乃勇许小露李丽芳朱家颖西南林业大学林学院云南省森林灾害预警与控制重点实验室云南昆明650224
黄镜梅 刘乃勇 许小露 李丽芳 杨 斌 朱家颖(西南林业大学林学院云南省森林灾害预警与控制重点实验室,云南昆明 650224)
管氏肿腿蜂感染Wolbachia的分子检测
黄镜梅 刘乃勇 许小露 李丽芳 杨 斌 朱家颖
(西南林业大学林学院云南省森林灾害预警与控制重点实验室,云南昆明 650224)
摘要:Wolbachia是一类在节肢动物中广泛感染的胞内共生菌,为了解Wolbachia在管氏肿腿蜂体内的感染情况,采用Wolbachia的通用引物、A大组特异性引物和B大组特异性引物对管氏肿腿蜂体内Wolbachia的wsp基因进行PCR扩增及序列测定,所获得的基因片段分别命名为wSgu、wSguA和wSguB,长度分别为620、572 bp和463 bp。基因序列分析表明wSgu与wSguB序列间碱基差异较大,同源性仅为60%。系统发育分析表明该寄生蜂感染了A大组的Wolbachia,但对于该寄生蜂是否也感染了B大组的Wolbachia尚待确定。
关键词:管氏肿腿蜂;Wolbachia;wsp基因;PCR;序列分析
Wolbachia(沃尔巴克氏体)是一种广泛存在于节肢动物中的细胞内共生菌,属于细菌门,变形杆菌α亚门的立克次氏体,为革兰氏阴性细菌。据统计,昆虫中Wolbachia的感染率已经达到70%以上[1]。Wolbachia是通过母系细胞质遗传,在寄主中能产生多种生殖调控行为来保证其在寄主中稳定遗传[2]。目前,对生物体内Wolbachia的检测,主要利用其l6S rDNA、ftsZ和wsp等进行PCR扩增与序列分析[3-6]。由于Wolbachia的wsp基因相对于其他基因进化最快,且在GenBank中登录的基因量也越来越多,因而该基因被广泛运用于Wolbachia的感染检测[5-6]。根据分子系统发生,将Wolbachia划分为11个超群(supergroup A-K);又根据wsp基因序列,将主要感染昆虫等的Wolbachia A大组和B大组进一步分为12个亚组[7]。……
