苏茂

摘 要 随着人们对畜禽产品兽药残留问题的日益重视，兽药残留检测方法逐渐增多。介绍畜禽产品中兽药残留的主要免疫学检测方法，包括酶联免疫法、胶体金检测技术、荧光定量检测、化学发光检测、放射免疫分析法及生物芯片检测技术，对每种方法特点及应用现状做一简介。希望为兽药残留检测的深入研究提供一些参考。

关键词 畜禽产品；兽药残留；免疫学检测方法

中图分类号：S859.84 文献标志码：B 文章编号：1673-890X（2016）12--02

兽药是畜禽生成中必不可少的一部分，能够降低发病及死亡率，提高养殖效益。但随着兽药种类及数量的持续上升，兽药滥用现象日趋严重。兽药在畜禽体内持续积累造成了兽药残留，残留超标会使消费人群中毒、过敏等；同时，也会引起耐药性、生态环境毒性等其他问题[1]。近年来，因兽药残留问题导致的食品安全信任危机逐步加剧，使之成为制约畜牧业发展的重要因素。兽药残留的控制离不开检测标准的制定及检测技术的发展。免疫学检测技术以抗原抗体的结合为基础，具有特异性强、灵敏度高、筛选速度快、操作简单等特点。随着免疫学技术的日趋完善，免疫学检测方法在众多兽药残留检测手段中脱颖而出，其应用越来越广泛。本文就近年来用于兽药残留的免疫学手段做一简要综述，以期为兽药残留检测提供参考。

1 酶联免疫测定法（ELISA）

ELISA方法是一种将抗原-抗体特异性反应与酶高效催化反应相结合的检测方法，是酶免疫测定法中应用最广的一种方法，具有操作简单、灵敏度高、批量检测等优势。检测时首先将抗原或抗体吸附于固相载体表面，后加入待测抗体或抗原，再加入酶标记的抗原或抗体，最后通过底物显色生成有色物质，根据吸光值对样品进行定性及定量分析。该方法对动物产品中的磺胺类、四环素类、己烯雌酚、苯巴比妥、氯霉素和黄曲霉素等兽药残留具有高灵敏度及准确度[2]。自ELISA方法首次用于兽药残留检测至今几乎所有常用兽药均建立了酶联免疫检测系统，大部分已应用于兽药残留的快速检测中。

2 胶体金免疫层析测定法（CGIA）

胶体金法将胶体金颗粒作为标记物，通过金标颗粒颜色的直观读取，定量定性的显示检测结果。该方法具有灵敏度高、操作简单、快速有效和成本低廉等特点。胶体金法将抗原或抗体以条带状预先固定于条状纤维层析材料上，金标抗体（单抗或多抗）固定于样本垫上，样品加入后在毛细作用推动下于层析试纸中泳动，与样本垫上金标抗体发生免疫反应，形成聚合物。当聚合物移动至预固定条带时被截留，聚集于条带处而呈色[3]。胶体金法用于定性检测时不需仪器可直观读取且试纸条携带方便，因此该方法适合现场检测。目前已有多种试纸条经农业部批准投入使用，应用于兽药残留检测。

3 荧光免疫测定法（FIA）

荧光免疫法是在抗原-抗体结合原理基础上使用荧光物质作为标记及检测依据的一种方法。荧光物质的选择是该方法的重点，也是限制其发展的主要因素。传统荧光物质干扰大、灵敏度低。时间分辨荧光免疫法、量子点荧光免疫法及荧光偏振免疫测定法等的出现使得FIA的灵敏度得到大幅提升，从而在兽药残留分析中得以迅速发展。FIA主要的优势是可进行全自动大批量检测[4]，相信在兽药残留检测中具有很好的推广前景。

4 化学发光免疫测定法

化学发光免疫测定法包括两个部分，以抗原-抗体结合为基础的免疫反应部分和以化学发光系统为基础的分析部分。该方法具有灵敏度高、特异性好、可全自动检测、有效期长且无辐射等优点[5]。研究显示，化学发光法与ELISA检测法符合率极高。目前，化学发光法已成为兽药残留免疫学检测的一个重要发展方向，未来可能取代放射免疫和ELISA。

5 放射免疫测定法

放射性免疫测定法是用同位素标记的抗原以及机体中抗原共同与抗体发生竞争性的免疫反应的原理，根据竞争效应的强弱程度来判断抗原的含量。这种方法具有成本低，操作简便，耗时较短等的特点，非常适合大量样本的检测鉴定。但这种测定试剂盒在制备及使用过程中会对环境造成一定的污染[6]，危害着人及动物的健康；同时还存在放射性试剂寿命较短的问题，因此，逐渐被非放射性测定方法所取代。

6 生物芯片检测

生物芯片技术的原理是将蛋白质、核酸等生物大分子密集有序的固定于经特殊处理的基片表面，然后与标记的样本进行杂交，然后洗去未结合的目标分子，使用特定的仪器对结果信号进行扫描读取，通过抗原抗体的亲和原理以及核酸序列的互补亲和原理来判断检测结果，达到检测的目的[7]。这种方法具有高效，高通量等其他方法所没有的优势。近年来，我国生物芯片技术领域取得了长足的进步，生物芯片技术已经广泛应用于兽药残留的检测，并具有越来越广的应用前景。

7 结语

畜禽产品中兽药残留问题与人民群众健康息息相关，控制兽药残留、保证食品安全是一项持久而艰巨的任务。近些年兽药残留的免疫学检测手段获得了快速发展，在众多免疫方法中脱颖而出。免疫学检测方法具有操作简单快速、高通量、准确和灵敏度高等优势，适合基层工作者现场筛查使用。随着兽药总类的增多、药物结构的日益复杂，多组分同时、快速检测将成为未来免疫学检测技术的发展趋势。相信通过不断改进及应用，免疫学检测手段将具有更广阔的应用前景，成为兽药残留检测的主要方法。

参考文献

[1]岳振峰.食品中兽药残留检测指南[M].北京：中国标准出版社，2010.

[2]徐伟，程凤科，孟银，等.酶联免疫吸附法在兽药残留检测中的应用[J].中国家禽，2013，35（12）：49-52.

[3]薛晓，荣霞，叶自霞，等.胶体金免疫层析法在畜禽产品兽药残留检测中的应用[J].动物医学进展，2013，34（12）：179-182.

[4]李丽华，白瑞樱，孙远明，等.环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用[J].食品科学，2012，33（8）：216-220.

[5]马玲，韦建兴，陆忠础，等.磺胺二甲嘧啶间竞争化学发光酶免疫分析法的建立及应用[J].中国食品卫生杂志，2014，26（5）：455-460.

[6]江秀红.兽药残留的快速检测技术研究进展[A].中国兽药大会暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会学术年会[C].2008：386-388.

[7]程景，李英杰，张易，等.畜禽产品中兽药残留检测技术研究进展[J].畜牧兽医科技信息，2009（10）：8-9.

（责任编辑：刘昀）