李晓碧

摘要：冰冻红细胞因其保存期长，质量可靠且经过洗涤后的生理形态及生化特性均与液体保存的红细胞相似等特点，因此，制备冰冻红细胞用于临床稀有血型患者的抢救输血具有非常重要意义，同时也是军队及地方医疗机构应对突发事件的重要血源。

关键词：制备；冰冻红细胞；临床

Nanchong Blood Preparation of Frozen RBC for Clinical

LI Xiao-bi

（Nanchong Red Cross Blood Center，Nanchong 637000，Sichuan，China）

Abstract：Frozen red blood cells，because it has long storage，reliable quality and it's physiological form and biochemical characteristics after washing are both similar to the red blood preserved by liquid，has a very important clinical significance in rescueing patient with a rare blood type，and is also the important blood shortage of military and local medical institutions when responding to emergencies.

Key words：Procedure of production；Frozen red blood cells；Clinic

冰冻红细胞的冰冻原理：红细胞的代谢速度取决于保存温度，如果把血液保存在很低的温度下，可使红细胞的代谢活动降低或完全停止，红细胞代谢耗能少，从而可避免代谢毒性产物的积累，达到延长红细胞保存期的目的。但是，血液在0℃以下时红细胞周围有冰晶形成，易刺破红细胞膜或损伤红细胞结构而引起溶血。保持红细胞在低温下长期保存而不受破坏是冰冻保存红细胞的关键。常用的方法是添加防冻剂防止胞内冰晶形成，甘油是最常用的防冻剂。

冰冻解冻红细胞的优点：保存期可长达10年，能部分调节血液供应不平衡现象，特别为RH 阴性稀有血型患者提供了方便，红细胞经洗涤后，去除了绝大部分白细胞、血小板和血浆蛋白，减少了输血反应。

为了降低输血风险，满足稀有血型患者用血需求，2012年9月，南充血站购进并安装调试了ACP215全自动红细胞处理机，工程师对成分科工作人员进行了培训，于11月上中旬，血站派成分科和质管科工作人员到上海血液中心进修学习，掌握了冰冻红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞制备原理和方法，及质量控制。这三年来南充血站根据RH阴性稀有血采集情况和临床需求进行了制备供应。

1 制备方法

设备、耗材、制剂：ACP215红细胞处理机、水浴箱、无菌导管连接器、热合机、转移袋、三珠袋、ACP215耗材（225#和235#）、复方甘油溶液（160ml/袋）、9%浓盐水（80ml/U）、0.9%生理盐水。

2 甘油化

①自采血日起6d内的全血或悬浮红细胞离心3800prm/10min，分离出红细胞；②开启ACP215电源，设备自检，离心机盖需反复开关三次；③用“修改程序”（MODIFY PROGRAM）键选择甘油化（GLYCEROLIZATION），按“是”（YES）确认；④取出ACP215一次性甘油化器材，关住所有滑动夹，与红细胞袋无菌连接，装入甘油化器材，检查耗材安装，红细胞袋固定在摇床上；⑤键入操作人员姓名代号，按“修改程序”（MODIFY PROGRAM）键修改程序参数，一单位红细胞添加160ml甘油，二单位红细胞添加320ml甘油；⑥按“开始”（START）键开始甘油化步骤 ，预冲耗材，加甘油进行中，机器摇床自动混匀甘油；⑦甘油化结束，机器发出嘟嘟声，加甘油程序结束（GLYCEROLIZATION COMPLETE），拆除耗材，关机。启动甘油化程序，约15min完成；⑧甘油化后室温静置30min，轻离心1250g/5min，去上清将甘油化红细胞转移至800ml低温袋，打印贴上冰冻红细胞标签后速冻成固状，再移入-65℃以下冰箱保存。

3 去甘油化

①将需去甘油的冰冻红细胞放入（37±1）℃水浴解冻。②开启ACP215电源，设备自检，离心机盖需反复开关三次。③用“修改程序”（MODIFY PROGRAM）键选择去甘油化，按“是”（YES）确认。④血袋称重，取出ACP215一次性去甘油化器材，关住所有滑动夹，将去甘油化器材红色管道用无菌接管机连接已称重的血袋，装入去甘油化器材，按“是”（YES）继续。⑤用无菌技术连接溶液和血液制品。⑥将连接好的融化的冰冻红细胞牢牢地放在摇动器平台上。⑦检查证实所有管道段被正确地装入适当的阀中，放开所有滑动夹，按“是”（YES）开始耗材核对。⑧键入操作人员。⑨按“修改程序”（MODIFY PROGRAM）键修改程序参数： 红细胞重量（Thawed Unit Weight），9%NaCl溶液容量（HYPE）。⑩按“开始”（START）键 ，开始去甘油化步骤。〇11结束后机器发出嘟嘟声，甘油程序结束（DE-GLYCEROLIZATION COMPLETE），拆除耗材，关机。〇12打印标签包装后入库再发往临床使用。启动去甘油化程序，约1.25h。

2012年9月～2015年9月，南充血站制备冰冻红细胞23袋（39.5U），用于临床抢救了急需RH阴性稀有血型患者的生命，特别是对RH阴性血孕产妇及宫外孕的抢救起到了决定性作用。

参考文献：

[1]林国连，韩日成，詹奕荣，等.冰冻红细胞的质量及其临床使用效果观察[J].广东医学院学报，2013，31（4）：446-447.

[2]邹文涛，梁兵，田兆嵩.冰冻红细胞的制备方法、质量研究及临床应用[J].中国输血杂志，2006，19（3）：254-257.

编辑/安桦