王宇 杨金易 徐振林 戚平 沈玉栋

摘 要 针对孔雀石绿三苯环特征结构，设计合成1种高质量半抗原。通过偶联载体蛋白、动物免疫和细胞融合， 制备出一株高质量的单克隆抗体MGDA4C7，亚类为IgG1，轻链为κ型。 通过对包被原浓度、抗体浓度、二抗浓度的优化，建立了孔雀石绿间接竞争酶联免疫分析方法。方法半抑制浓度（IC50）为0.96 μg/L，线性检测范围（IC20～C80）为0.1～8.1 μg/L，LOD（IC10）为0.05 μg/L，回归方程y=

Symbolm@@ 0.3274lgx+0.4698（R2=0.9891）。 本方法特异性高，与代谢物隐孔雀石绿交叉反应小于0.1%，与结晶紫、灿烂绿交叉反应率分别为18.1%和26.5%； 实际样品添加回收率为87.3%～107.3%。 本方法测定结果经HPLCMS/MS方法确证，二者相关系数达0.999。本方法可用于鱼类等水产品中孔雀石绿残留的实际检测。

关键词 孔雀石绿； 半抗原； 单克隆抗体； 抗原识别； 酶联免疫分析