神经干细胞移植减少脑出血大鼠神经功能的凋亡
2016-05-09祁绍艳刘晓静刘小军
祁绍艳 祁 景 刘晓静 刘小军
郑州大学第二附属医院重症医学科 郑州 450014
神经干细胞移植减少脑出血大鼠神经功能的凋亡
祁绍艳 祁 景 刘晓静 刘小军
郑州大学第二附属医院重症医学科 郑州 450014
目的 探讨神经干细胞移植对脑出血大鼠神经功能的影响。方法 采用立体定位仪制作脑出血大鼠模型,随机将大鼠分为sham组、ICH组及NSCs组,通过mNSS评分定量评价细胞移植后,观察脑出血大鼠在第1、3、7、14、28天的神经功能的行为学的动态变化;进行Caspase-3的免疫组织化学及灰度分析,观察其表达情况。结果 NSCs组mNSS评分在14、28 d均较ICH组明显改善(P<0.05)。NSCs组大鼠脑血肿周围组织的Caspase-3的表达水平较ICH组明显降低(P<0.05)。结论 NSCs移植能有效改善脑出血大鼠的神经功能评分,其机制可能是通过调节Caspase-3的表达减少细胞凋亡。
NSCs;脑出血;凋亡
脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)是一种高的病死率及高致残率的严重威胁人类健康的重大疾病,目前尚无有效的办法治疗脑出血引起的严重神经功能障碍,干细胞移植治疗是目前脑出血研究的主要方向之一,但干细胞移植治疗脑出血的机制仍不明确[1]。本文对NSCs移植治疗脑出血在细胞凋亡方面的机制进行探讨。
1 材料和方法
1.1 实验材料 动物:SD大鼠的饲养及相关实验程序均经过郑州大学伦理委员会批准。选取SPF级雄性SD大鼠30只(250~300 g)均来自河南省实验动物中心提供;细胞:NSCs为本实验室自已保存。
1.2 主要试剂和仪器 DMEM、DMEM/F12、胰蛋白酶、青霉素-链霉素溶液(Pen-Strep solution),抗体Caspase-3(美国invitrogen公司);DMSO、Polyrene(sigma公司);胎牛血清(hyclone公司);Ⅶ型胶原酶(sigma公司),鼠脑立体定位仪(日本Narishige SN-3公司),DAB试剂盒(北京中杉金桥生物技术公司);倒置显微镜(德国LEICA公司)。
1.3 实验方法
1.3.1 实验动物的分组及动物模型的制作:随机选取雄性SD大鼠30只分为sham组……
