吕　倩， 涂云华， 李　剑， 刘涛华， 张荣庆， 罗　垚， 康颖倩*

(1.贵州医科大学 微生物学教研室， 贵州 贵阳　550004； 2.贵州医科大学附院 皮肤性病科， 贵州 贵阳　550004)



不同来源茶树组织的茶多酚含量比较*

吕倩1**， 涂云华2， 李剑1， 刘涛华1， 张荣庆1， 罗垚1， 康颖倩1***

(1.贵州医科大学 微生物学教研室， 贵州 贵阳550004； 2.贵州医科大学附院 皮肤性病科， 贵州 贵阳550004)

[摘要]目的： 比较不同茶树组织中茶多酚的含量，为茶树修剪枝叶的利用提供参考。方法： 通过生石灰水沉淀法提取绿茶树的新鲜叶、干燥叶、新鲜树枝、干燥树枝的茶多酚粗提取物和纯化茶多酚，比较4种茶树组织的茶多酚粗提取物质量及提取率；采用分光光度计法测定标准茶多酚吸光度(A)值，绘制茶多酚标准曲线，通过4种茶树组织纯化茶多酚的吸光度(A)值在标准曲线上获得茶多酚含量并计算其纯度，比较4种茶树组织纯化茶多酚含量和纯度。结果: 茶树组织茶多酚粗提取物质量及提取率从高到低依次为新鲜叶、干燥叶、新鲜树枝及干燥树枝，茶多酚含量从高到低依次为新鲜叶、干燥叶、新鲜树枝及干燥树枝，纯度从高到低依次则为新鲜叶、新鲜树枝、干燥叶及干燥树枝。结论: 新鲜茶叶和新鲜茶树枝的茶多酚含量较高，可为茶叶及茶树枝综合开发利用提供参考。

[关键词]茶； 茶多酚； 生石灰水沉淀法； 萃取，茶树组织； 分光光度法

充分开发茶叶的用途，开展茶叶的综合利用是一项具有重要意义的研究课题。茶多酚是上世纪初日本科学家发现的一种茶叶提取物，是一种天然抗氧化剂[1-3]，具有抗衰老、抗癌、消除人体过剩的自由基、抗辐射、降低血脂等功效[4-7]。在日常生活中人们通常用炒熟的茶叶来泡制茶水，很少使用新鲜茶叶或茶树枝。而在茶园中，定期修剪保持茶树采摘面积是茶叶丰产的重要措施，每年产生大量的废弃修剪枝叶，造成不必要的浪费[8]。目前，国内关于不同来源茶树组织所含茶多酚含量研究报道较少，本研究以茶树组织的新鲜叶、干燥叶、新鲜树枝及干燥树枝为原料，通过生石灰水沉淀法提取茶多酚并测定其含量，为茶叶加工过程中的大量修剪枝叶充分开发利用提供参考依据。

1材料与方法

1.1材料、试剂与仪器

选用贵州省遵义市凤冈县经处理后的绿茶树不同部位(新鲜叶、干燥叶、新鲜树枝及干燥树枝)为供试茶树组织，茶多酚标准品、722分光光度计、旋转蒸发器、乙酸乙酯、酒石酸亚铁溶液。

1.2方法

1.2.1提取茶多酚采用生石灰水沉淀法[9]提取。称取茶组织190 g，加适量蒸馏水后100 ℃加热20 min，过滤，收集滤液。向滤液中加入适量石灰水调节滤液 pH 7～8，静置 24 h。利用循环水式真空泵加速使滤液抽入滤瓶，抽滤完全后小心刮取布氏漏斗中滤纸上的石灰水提取物。用乙酸乙酯溶解石灰水提取物，将溶解液置于已经加入等量盐酸分液漏斗中，进行萃取，放出下层盐酸溶液，再放出上层乙酸乙酯溶液。用水浴回流蒸馏装置回收乙酸乙酯，将回收乙酸乙酯后剩余的物质干燥，得到茶多酚粗提取物。重复乙酸乙酯萃取步骤，得到纯化的茶多酚晶体。

1.2.2绘制茶多酚标准曲线[1]称取茶多酚标准品0.25 g，加水定容至250 mL，混匀，即为1 g/L茶多酚标准溶液。分别吸取茶多酚标准溶液1.0、2.0、3.0及4.0 mL各加水至10 mL(换算后每克茶组织中分别含31.061、61.943、92.962及122.374 mg茶多酚)，分别加酒石酸亚铁溶液10 mL，加入pH 7.5的磷酸缓冲液至50 mL，在波长540 nm处分别测定吸光度值(A)，以每克茶组织所含茶多酚含量为纵坐标，吸光度值(A)为横坐标，绘制茶多酚标准曲线[10]。

1.2.3纯化茶多酚含量及纯度精确称取200 mg茶多酚置于100 mL的烧杯中，加入30 mL沸水冷却后转移至100 mL的容量瓶中，准确量取1 mL置入25 mL的容量瓶中，加入5 mL的酒石酸铁，用标准缓冲溶液(pH=7.5)稀释至刻度，于波长 540 nm处测定吸光度值(A)，从茶多酚标准曲线获得茶多酚的含量。根据获得的茶多酚含量计算4种茶树组织提取的茶多酚纯度，茶多酚纯度(%)=茶多酚质量/提取的茶多酚粗品质量×100[11]。

2结果

2.1茶多酚标准曲线

根据茶多酚标准溶液测定结果绘制茶多酚标准曲线(图1)。得到线性回归方y=205.5x+0.221，R2=1，表明曲线具有良好的线性关系。可根据标准曲线获得不同茶树组织的茶多酚含量。

图1　茶多酚标准曲线Fig.1　Tea polyphenols standard curve

2.2茶多酚粗提取物质量及提取率

初步回收乙酸乙酯后，所得茶多酚的粗提取物质量及提取率从高到低依次为新鲜叶、干燥叶、新鲜树枝及干燥树枝，见表1。

2.3纯化茶多酚的茶汤颜色、含量及纯度

从茶多酚标准曲线获得的结果显示，4种茶树组织中，新鲜叶的茶多酚含量最高，其次为干燥叶、新鲜树枝及干燥树枝；纯度从高到低依次则为新鲜叶、新鲜树枝、干燥叶及干燥树枝；4种茶树组织茶汤颜色均为黄褐色。见表2。

表1　茶多酚粗提取物质量及提取率

表2　不同来源茶树组织所提取的纯化茶

3讨论

茶叶经过加工热炒后能够较长时间储藏，其滋味和香气更加令人愉悦，其细胞组织使更多的对人体有益的物质能够容易地通过冲泡而被人们吸收[12]。而在茶园中，定期修剪保持茶树采摘面积是茶叶丰产的重要措施，每年会产生大量的废弃修剪枝叶[10]。直接修剪的枝叶容易导致茶园土壤酸化[3]，不仅影响耕地，还会对茶园的生态系统造成影响。茶多酚是茶叶中多羟基酚类化合物的混合物[13]，占茶叶干重的15%～30%[14]。

目前，提取茶多酚的技术和方法已经十分成熟和稳定，从茶叶中提取茶多酚的纯度已高达99%。本研究通过生石灰水沉淀法[9]提取不同茶树组织的茶多酚，结果表明新鲜叶的茶多酚含量最高。可能是新鲜茶叶保持了茶叶最原始自然的状态，储存的多酚类物质含量最高。说明在不经过加工、干燥的情况下，新鲜茶叶能最大程度保留茶多酚。而干燥茶叶经过长时间储存，水分蒸发，组织细胞受损，部分化学物质被氧化，因此茶多酚含量低于新鲜茶叶。不论干燥与否，茶叶中茶多酚均含量高于茶树枝。但新鲜茶树枝的茶多酚含量仅比干燥茶叶小一点。这为茶园中大量的废弃枝叶的再利用给予启发。并且新鲜茶树枝茶多酚纯度高于干燥茶叶，说明利用新鲜茶树枝提取茶多酚方法可行。综上，新鲜茶叶和新鲜茶树枝的茶多酚含量较高，可为茶叶及茶树枝综合开发利用提供参考。

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(2015-11-25收稿，2016-02-09修回)

中文编辑： 吴昌学； 英文编辑： 刘华

Comparative Study on Content of Tea Polyphenols Extracted from Different Tea Plant Tissue

LYU Qian1， TU Yunhua2， LI Jian1， LIU Taohua1， ZHANG Rongqing1， LUO Yao1， KANG Yingqian1

(1.DepartmentofMicrobiology,GuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,GuizhouChina; 2.DepartmentofDermatologyandVenerealDisease,theAffiliatedHospitalofGuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China)

[Abstract]Objective: To compare the tea polyphenols amount extracted from different tea plant tissure, and to provide the scientific reference for full development and utilization of tea branches and tea leaves. Methods: The tea polyphenols from four different tea plant tissue(fresh tea leaves, dry tea leaves, fresh tea branch and dry tea branch) were extracted by limewater precipitation method. The quality of tea polyphenols crude extract and rate of extraction were compared between 4 different tea plant tissue. Spectrophotometry was adopted to determine absorbance of tea polyphenols of standard concentration and the standard curve of tea polyphenols was plotted, by which the tea polyphenols content and purity of 4 different tea plant tissue was calculated and compared. Results: In 4 different tea plant tissue, the quality of tea polyphenols crude extract and rate of extraction from high to low in order were fresh tea leaves, dry tea leaves, fresh tea branch and dry tea branch, the tea polyphenols content from high to low in order were fresh tea leaves, dry tea leaves, fresh tea branch and dry tea branch, and the tea polyphenols purity from high to low in order were fresh tea leaves, fresh tea branch, dry tea leaves and dry tea branch. Conclusion: The tea polyphenols content in fresh tea leaves and fresh tea branch is relatively high. The study provides the scientific reference for full development and utilization of tea branches and tea leaves.

[Key words]tea; tea polyphenols; lime water precipitation; extraction; tea plant tissue; spectrophotometry

[中图分类号]Q657.8

[文献标识码]A

[文章编号]1000-2707(2016)03-0265-03

*[基金项目]国家自然基金地方项目(31060006，31260029)； 贵州省社会发展科技攻关项目[黔科合SY字(2011)3017号]； 贵州省卫生厅科技项目(gzwkj2010-1-025)； 贵阳市科技局社会发展与民生计划[筑科合同(2011103)16号]

**贵州医科大学2013级硕士研究生

***通信作者 E-mail:joycekangtokyo@qq.com

网络出版时间：2016-03-17网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20160317.1024.020.html