李志海

(鄄城县人民医院，山东 鄄城　274600)



不同浓度葡萄糖对体外培养人成骨细胞活性的影响及意义*

李志海

(鄄城县人民医院，山东 鄄城274600)

摘要：目的观察不同浓度葡萄糖对体外培养的人成骨细胞的影响，探讨糖尿病致骨质疏松症可能的发病机制。方法将4种不同浓度葡萄糖(5.5，10，20，40 mmol/L)的培养基培养人成骨细胞，培养3~12 d。观察葡萄糖对细胞增殖、凋亡及对细胞分泌碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)能力的影响。结果在一定浓度范围内，葡萄糖浓度越高，细胞增殖越明显，细胞分泌ALP和BGP的能力下降，细胞凋亡率增加。结论高糖环境对人成骨细胞分泌能力有抑制作用。

关键词：葡萄糖；骨质疏松症；人成骨细胞；碱性磷酸酶；骨钙素

糖尿病可导致全身各系统发生变化。作为骨代谢的最终效应细胞之一的成骨细胞也因此受到影响。研究发现[1-4]糖尿病可影响动物成骨细胞活性，对人成骨细胞的研究较少。2008~2009年，我们根据糖尿病血糖升高的特点，观察不同浓度的葡萄糖对人成骨细胞的影响，探讨糖尿病导致骨质疏松的机制。

1材料与方法

1.1实验材料

人成骨细胞，取引产1 h内的7个月龄的胎儿骼骨松质骨，根据郑永志[5]等提供方法制备人成骨细胞。DMEM低糖型培养基、新生牛血清、50%葡萄糖注射液、胰酶、Ⅱ型胶原酶、噻唑蓝(MTT)、二甲亚砜(DMSO)、碱性磷酸酶(AKP)测定试剂盒、降钙素(BGP)检测试剂盒、FITC/PI凋亡检测试剂盒、倒置相差显微镜、流式细胞仪。

1.2实验分组

将制备第3代细胞按2×104/ml接种于96孔板，更换为含5.5(生理剂量，G0组)、10(G1组)、20(G2组)、40(G3组)mmol/L葡萄糖的培养基。……