刘 晋 邓汉超 王学林 侯红利 李永红 杨启鹏 陈惠芳 周向阳

（农业部农作物种子质量监督检验测试中心（深圳）/深圳市农业科技促进中心，广东深圳518040）

转基因水稻标准质粒分子的构建与分析

刘 晋 邓汉超 王学林 侯红利 李永红 杨启鹏 陈惠芳 周向阳

（农业部农作物种子质量监督检验测试中心（深圳）/深圳市农业科技促进中心，广东深圳518040）

针对目前转基因（GM）产品检测标准分子的缺乏，构建适用于转基因水稻的标准质粒分子pMDSPS和pMDTheli，其中包含水稻内源基因SPS通用序列，耐盐基因ThST3和Ubiquitin启动子序列的构建特异性Theli序列。对其特异性及制备标准曲线的可靠性进行鉴定研究，研究结果显示，在进行普通PCR扩增时，采用质粒标准分子为阳性对照，均能特异扩增目的条带。以标准质粒分子构建的标准曲线，SPS基因的定量标准曲线的相关系数平均为0.9993，PCR扩增效率在1.0004～1.034之间；ThST3基因的定量标准曲线的相关系数平均为0.9937，PCR扩增效率在0.9358～0.9486之间。因此，构建的标准分子pMDSPS和pMDTheli既能作为普通PCR的阳性对照，也能用于定量标准曲线的构建，为转基因水稻的定量检测提供简便、价格低廉的标准分子打下基础。

标准质粒分子；实时荧光PCR；标准曲线；PCR效率

随着转基因（GM，genetically modified）技术的不断发展，产生（获得）更多优良的作物品种有望在解决全球粮食危机方面作出贡献，然而转基因产品的出现也引发公众对转基因产品影响食品安全与环境安全的担忧。因此，世界各国政府和组织都非常重视转基因作物及产品的食用安全的监管，纷纷建立转基因标识的制度。……