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SD大鼠骨髓间充质干细胞培养、纯化与鉴定

2016-04-11栾海燕李广文杨朝艳齐志远曹思樟吕波涛裴永泉程硕

西南国防医药 2016年2期

栾海燕,李广文,李 卉,王 军,辛 越,杨朝艳,田 青,何 伟,齐志远,曹思樟,吕波涛,裴永泉,梁 政,程硕



SD大鼠骨髓间充质干细胞培养、纯化与鉴定

栾海燕,李广文,李卉,王军,辛越,杨朝艳,田青,何伟,齐志远,曹思樟,吕波涛,裴永泉,梁政,程硕

[摘要]目的探讨SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外培养、纯化及鉴定的方法。方法对1 w龄SD大鼠脱颈处死后,剥离大鼠两侧后肢股骨和胫骨提取BMSCs,采用全骨髓贴壁法分离、培养、纯化BMSCs,观察细胞形态变化,绘制生长曲线,并通过成骨、成脂诱导、克隆形成率等方法对其进行鉴定。结果应用全骨髓贴壁培养法体外分离、纯化、培养的SD大鼠BMSCs生长迅速、生长曲线较好,经过成骨、成脂、克隆形成率等方法鉴定证实其为SD大鼠BMSCs。结论全骨髓细胞贴壁培养法是分离、纯化与培养BMSCs的一种有效方法,能较快获得增殖能力较强的原代细胞用于实验研究。

[关键词]骨髓间充质干细胞;原代培养;纯化;大鼠

骨髓间充质干细胞(bone marrow deriVed mesenchyma1 stem ce11s,BMSCs)是骨髓内存在的一类非造血干细胞,也称骨髓基质干细胞(marrow stroma1 stem ce11s,MSCs)。其来源于中胚层间充质,在体内外具有支持和调控成骨的作用,并且在体内可分布于多种组织和器官,并具有多向分化潜能,能够向成骨系细胞、成纤维系细胞、网状细胞、脂肪细胞和内皮细胞等分化,因此也是多能或全能干细胞。在实验中获取符合要求的BMSCs就必须将其在体外进行分离、纯化、鉴定和增殖,以获取足量符合要求的BMSCs。本研究采用全骨髓贴壁培养法分离、纯化、培养获取SD大鼠BMSCs,并对其进行多向分化和增殖潜能的鉴定,为相关实验研究提供依据。……

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