杨　爽， 尹　姣， 张炬红， 李克斌， 席景会*

1吉林大学植物科学学院，吉林 长春 130062；2中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 100193



一种适合稻水象甲双向电泳的蛋白质提取方法

杨爽1， 尹姣2， 张炬红1， 李克斌2， 席景会1*

1吉林大学植物科学学院，吉林 长春 130062；2中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 100193

摘要:【背景】蛋白样品制备是2-DE蛋白组学研究的关键步骤，无杂质、高纯度的蛋白样品是获得良好的2-DE结果的基础。选择合适于昆虫蛋白组学研究的常规蛋白提取方法是2-DE研究的前提。【方法】通过饱和酚法和TCA-丙酮法提取稻水象甲成虫总蛋白，比较2种方法的优缺点,以回避昆虫组织蛋白提取时可能出现的问题。【结果】TCA-丙酮法的蛋白质产率(14.55 μg·mg-1)显著高于饱和酚法(9.30 μg·mg-1)，2种方法获得的SDS-PAGE条带结果相近，且高丰度表达蛋白在TCA-丙酮中更高表达；饱和酚的2-DE图谱蛋白点清晰，TCA-丙酮法2-DE图谱蛋白点规则但背景模糊，出现多条横纹。【结论与意义】饱和酚法适合稻水象甲成虫蛋白组学的研究。这2种方法也能适用于其他昆虫，但不同的昆虫体内有不同的干扰组分来干扰蛋白质的提取，所以获得的蛋白纯度及提取得率可能并不一样。试验结果说明了2种蛋白提取方法对2-DE研究的影响，并为稻水象甲成虫的蛋白组学研究提供了一定的参考依据。

关键词:2-DE; 蛋白提取； 稻水象甲； TCA-丙酮； 饱和酚

随着昆虫基因组学计划的实施，昆虫分子生物学研究已进入后基因组时代，这一转变的显著标志之一是蛋白质组学的兴起(Tyers & Mann，2003)。……