全肺去细胞生物支架的制备与鉴定
2016-04-08陈婵王志斌翁杰虞青徐恩盼陈纳孟卓杜晓红陈世新温州医科大学附属第一医院老年医学科浙江温州505温州医科大学解剖学教研室浙江温州505温州医科大学附属第二医院急诊科浙江温州507温州医科大学第二临床医学院临床医学系浙江温州505
陈婵,王志斌,翁杰,虞青,徐恩盼,陈纳,孟卓,杜晓红,陈世新(.温州医科大学附属第一医院 老年医学科,浙江 温州 505;.温州医科大学 解剖学教研室,浙江温州 505;.温州医科大学附属第二医院 急诊科,浙江 温州 507;.温州医科大学 第二临床医学院临床医学系,浙江 温州 505)
全肺去细胞生物支架的制备与鉴定
陈婵1,王志斌2,翁杰3,虞青4,徐恩盼4,陈纳4,孟卓4,杜晓红1,陈世新2
(1.温州医科大学附属第一医院 老年医学科,浙江 温州 325015;2.温州医科大学 解剖学教研室,浙江温州 325035;3.温州医科大学附属第二医院 急诊科,浙江 温州 325027;4.温州医科大学 第二临床医学院临床医学系,浙江 温州 325035)
[摘 要]目的:通过聚乙二醇辛基苯基醚(TritonX-100)、十二烷基磺酸钠(SDS)灌注法制备大鼠全肺去细胞生物支架,并对其进行鉴定。方法:20只SD大鼠随机数字表法分成去细胞组与正常对照组,每组10只,分别取心、肺联合体,去细胞组经右心室置入留置针至肺主动脉,恒温37 ℃依次灌注肝素化PBS溶液、1% TirtonX-100、0.8% SDS及去离子水。进行DNA定量分析,HE染色及免疫荧光观察残留细胞及细胞核成分,丙烯腈-丁二烯-苯乙烯树脂(ABS)铸型观察肺内血管分布情况。结果:去细胞组DNA含量为(40.37±5.01)ng/mg,较正常对照组的(846.64±65.70)ng/mg下降95%以上;HE染色及免疫荧光染色见去细胞组肺生物支架保留了大量细胞外基质,未见明显细胞及细胞核成分残留;血管铸型标本显示去细胞组血管分布与正常对照组相仿,其分支完整、清晰。结论:TritonX-100、SDS灌注法可有效清除肺内细胞成分,较好地保留细胞外基质(ECM)和血管网络结构,是一种简便且较为理想的制备组织工程肺生物支架方法。……
