文/王小亮　徐立蒲　张文　王澎　曹欢　王姝　王静波



北京市养殖鱼类主要病原菌及其药物药敏性

文/王小亮徐立蒲张文王澎曹欢王姝王静波

由于水产养殖环境恶化，各种水产病害频发，特别是细菌性疾病更为严重，已给养殖业造成重大经济损失。为此，本文针对北京地区开展养殖鱼类常见病原菌调查，并进行鱼类病原菌药物敏感性的监测，了解其耐药现状，构建药物敏感谱并不断更新，筛选出有效防治药物，指导养殖户科学合理使用抗菌药物。

一、材料和方法

（一）试验材料

1.样品来源

北京市发病的养殖鱼类，包括鲤、锦鲤、鲫、金鱼、草鱼、鲟、虹鳟。

2.仪器

超低温冰箱（MDF-382，日本SANYO公司），生化培养箱（LRH-150B,上海一恒公司）、细菌浊度计（WGZ-2-X，上海昕瑞仪器仪表有限公司）、PCR仪（Mastercycle Gradient，德国Eppendorf公司）、电泳仪（DYY-6C，北京六一仪器厂）、凝胶成像系统（IS-3400，Alpha Innotech 公司）。

营养琼脂、大豆酪蛋白琼脂、Mulluer-Hinton肉汤（MHB）、Mulluer-Hinton琼脂（MHA）、寡营养琼脂、脑心浸液肉汤培养基（BHI）和脑心浸液琼脂（BHIA）购于北京陆桥技术有限责任公司，血琼脂购于北京威泰科生物技术有限公司，药敏纸片购于杭州诺森德生物技术公司，抗菌药物购于美国Sigma公司。

（二）试验方法

1.病原菌分离方法

将病鱼置于灭菌解剖盘中，用75%酒精棉球擦拭鱼体。如果鱼体表有红肿、溃疡等病灶，用75%酒精棉球蘸擦病灶，然后用灭菌解剖刀沿病灶边缘靠近新鲜组织约1mm处切开，切面即为取样部位。如鱼体表无异常，用灭菌剪刀在肛门前约5mm处横向剪透腹腔，然后从开口处向上沿测线下缘剪至鳃盖下缘，再向下剪，过腹部至另一侧的鳃盖下缘，将剪开的一侧翻开，露出内脏。……