俞越钱（浙江工业大学化学工程学院，浙江　杭州310014）



牛乳清结晶条件的探索及其结晶体形貌

俞越钱
（浙江工业大学化学工程学院，浙江杭州310014）

摘要：以脱脂及去酪蛋白的牛乳清为原料，利用紫外分光光度法及SDS-PAGE电泳技术，在pH 4.7～8.0，NaCl浓度0.5～2.0 mol/L条件下，对其结晶情况进行了研究。结果表明：牛乳清蛋白中的免疫球蛋白G（IgG）是一种理想的目标蛋白，而pH 7.0则是得到IgG的理想pH。最后还利用了工业相机及荧光倒置显微镜对牛乳清结晶体进行了拍摄，发现其中主要有长方晶、四角晶、菱方晶三种结晶体形貌。

关键词：牛乳清；结晶；结晶体形貌；免疫球蛋白

乳清蛋白是牛奶中重要的一类蛋白，其中主要包括IgG、乳铁蛋白、乳过氧化物酶、牛血清蛋白（BSA）等[1]，研究[2]表明：牛乳清中各类蛋白均具有一定的生物活性和功能，所以分离乳清蛋白成了至关重要。

层析是一种分离乳清蛋白的重要手段[3]，但是从工业角度来讲，层析过程主要有两个弊端：第一是设备成本高;第二是操作难度大。因此，找一种方法对工业层析过程做补充是有意义的。而结晶就是一种能补充层析的方法[5]。为此，要利用结晶方法得到乳清蛋白，首当其冲的问题就是选择合适的结晶条件。

结晶过程的条件一般包括结晶剂、pH、温度、搅拌速度等[6]。其中，结晶剂可为盐[7-8]或有机试剂[9]。对于蛋白质体系，NaCl是一种最常见的结晶添加物[10]，而且层析的洗脱过程中往往也要引入NaCl，它是一种常见的洗脱剂。那么，为了能与层析过程做对接，且不引入其他物质致使体系更为复杂，本工作将NaCl作为牛乳清结晶剂。……