GST-endostatin重组表达及其对宫颈癌HeLa细胞生长抑制作用研究

周雨霏 陈珊宇 戴明明

目的利用分子生物学手段重组表达endostatin，提高endostatin抑制肿瘤细胞的作用。方法利用RT-PCR 从老鼠的肝脏中取得endostatin的 cDNA，经过 DNA 测序确定后 ，将它植入载体并表达产生大量的重组蛋白质（GST-endostatin）。以宫颈癌HeLa细胞为研究对象，通过将表达重组的GST-endostatin与HeLa细胞作用，研究其对HeLa细胞的抑制作用。结果重组表达GST-endostatin分子量约为46 kDa，产量约为1．5 mg/L。研究结果表明，GST-endostatin可以在20 nM 的浓度抑制HeLa细胞生长速率达50%。结论该重组表达GST-endostatin可溶性强，对HeLa细胞抑制作用明显，是一种较好的抗血管生成抑制剂，但其抑制HeLa细胞增生的机制尚需进一步研究。

GST-endostatin；抗肿瘤；外源表达

利用抗血管生成的方式来治疗癌症，因其具有作用广泛、低毒性以及不易产生抗药性等优点，已经引起越来越多的应用。在新进增加种类的抗血管生成抑制剂中，内皮抑素（endostatin） 是最受到注目的一种，其直接以内皮细胞做为治疗目标，较不易引起细胞抗药性的发生。如同 血管抑制素（angiostatin）或抗血管生成抑制剂（vasostatin），endostatin是细胞外胶原蛋白 XVIII（collagen XVIII）经过蛋白质水解脢作用后的一个片段 （约为20 kDa）。它能有效地抑制内皮细胞的增生与血管的生成，但是对癌细胞本身却不具任何毒杀效果［1］。先前实验利用遗传工程生产出末端组氨酸修饰恩度（His-tagged endostatin）并定期注射治疗带有肿瘤生长的老鼠，能导致肿瘤的萎缩并使肿瘤细胞处于休眠期，而这整个治疗过程并不会导致抗药性的发生［2］。但是受Histagged endostatin溶解性低限制，该融合蛋白对肿瘤细胞抑制作用也受到相应限制［3-4］。……