霍婷婷　贾金虎

1兰州军区兰州总医院保健一部，甘肃兰州730050

2酒泉市人民医院呼吸内科，甘肃酒泉735000

EGFR基因检测在非小细胞肺癌诊疗应用中的新进展

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1兰州军区兰州总医院保健一部，甘肃兰州730050

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表皮生长因子受体（EGFR）是近年来关于非小细胞肺癌（NSCLC）发病机制中新的细胞分子受体，针对EGFR基因突变研究出的分子靶向药物是治疗NSCLC策略中成功有效的靶点途径，与传统一、二线化疗方案相比，其具有精准杀伤肿瘤细胞，对机体正常细胞损伤小，不良反应较少等优点，从而延长了NSCLC患者的生存期，并提高了生活质量。然而近年来的研究提示，分子靶向药物的耐药性对其持续精准治疗的有效性构成了严重影响。本文就EGFR基因的生物学特性，基因突变及与NSCLC的关系作一综述，并探讨EGFR受体在未来NSCLC治疗领域中的前景。

EGFR；NSCLC；研究进展；基因突变

非小细胞肺癌（non-smallcellcarcinoma，NSCLC）是我国肺癌的主要病理类型，占肺癌患者总数的80%～85%［1］，主要包括腺癌、鳞癌、大细胞癌等，与其他恶性肿瘤类似，NSCLC主要以肺部局部肿瘤症状和全身转移症状为主［2］，与小细胞肺癌相比，其转移速度相对较慢，生存期略长于小细胞肺癌［3］，但NSCLC对传统放化疗并不敏感，且因长期化疗对机体正常细胞的损害使患者难以承受，最终导致患者病死于多种化疗并发症。近年来，随着对EGFR基因的不断研究，其在NSCLC致病中的机制逐渐阐明［4］，针对EGFR基因突变机制及特异性调节体内肿瘤生物信息转导等途径的分子靶向药物的问世，通过精准分子靶向途径杀伤肿瘤细胞，且对正常机体细胞的损伤甚少［5］，这为NSCLC患者进行广泛分子靶向治疗带来新的希望，然而表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor，EGFR-TKI）耐药的产生，成为未来分子靶向精准治疗的“瓶颈”。

1　EGFR的生物学特性

表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）最早于1962年由Stanley Cohen在小鼠的颌下腺中发现［6］，此后多种生物体的表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）被相继发现，EGFR主要存在于胃肠道、肾、真皮组织、血管上皮组织细胞膜上［7］，是由1186个氨基酸残基组成的糖蛋白，相对分子量为170×103，基因定位于人第7号染色体的短臂，含有28个外显子。EGFR由细胞外域、细胞内域、跨膜区三个部分组成［8］，细胞内域是EGFR基因最重要的部分，含有很多络氨酸残基［9］，通过磷酸化及细胞信号转导通路可在多数上皮细胞肿瘤中过度表达，也是最早发现于人类B癌基因家族编码跨膜的糖蛋白之一［10］，其在肿瘤的发生、发展、活化过程中发挥重要作用［11］。最新发现EGFR的胞外域与EGF相应配体结合后通过二聚化或异聚化过程参与肿瘤的形成，实现自身磷酸化的同时激活主要酪氨酸残基，并进一步激活与细胞增殖、凋亡有关的通路，从而参与并调节细胞的生长、分化与增殖，另一方面，EGFR为肿瘤的生长提供了丰富的供血［12］。

2　EGFR在NSCLC发生发展过程中的作用

EGF是一种能够促进细胞有丝分裂的因子，能与EGFR相应受体结合后促进细胞的增殖、分化，特别是肿瘤细胞的增殖，进而引起细胞恶性转化［13］，EGFR的主要成分是受体酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinase，RTK），其中酪氨酸激酶胞内区有典型的ATP结合位点及酪氨酸激酶区［14］，而酪氨酸激酶在细胞增殖活化过程中发挥关键性作用。EGFR胞外区的专一配体双调蛋白（amphiregulin，AR）与EGF等刺激信号作用于RTK后启动细胞信号转导途径［15］，通过一系列级联反应激活拟南芥基因AP-1，核转录因子B等重要的转导因子，最终使细胞核内早期反应基因水平增加，使得细胞增殖转化［16-17］。与此同时，核转录因子的增加可直接结合EGFR启动因子，使EGFR表达增加［18］。在这一过程中，有丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）及磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）途径是实现细胞信号核内转导的主要路径［19］；另一方面，EGFR可通过与相应受体结合而实现自身磷酸化，并通过上述途径发挥细胞内基因的相关功能，而且AR可促进肿瘤细胞的合成，并产生持久的MAPK活性，诱发EGFR的过度表达，特别是当EGFR羧基端缺失时，MAPK活性更为显著，EGFR过度表达和突变及信号转导通路的异常，最终导致细胞DNA复制及细胞分裂过度，从而导致细胞生长失控和恶性化，从而形成肿瘤［20］。肺癌多见于支气管上皮细胞，而上皮细胞正是EGFR存在的主要部位，在NSCLC形成过程中，和其他肿瘤的形成途径一样，EGFR扮演着重要的角色。近年来针对EGFR基因突变的最新研究显示，EGFR基因突变主要存在于外显子18、19、20、21［21］，而目前临床上已经广泛应用的EGFR-TKI制剂的疗效已被证实与外显子19、21关系密切，随着检测技术的发展，实时荧光PCR法和测序法是EGFR检测的可靠方法，并通过基因扩增技术显示常见突变外显子19和21片段。谢丽［22］等通过高灵敏度检测技术的建立，采用血浆检测EGFR-19外显子突变已被证实是结果可靠，灵敏度较高且方便的检测方法，因此EGFR及其外显子突变的检测是NSCLC治疗前用药选择及药物疗效评价的可靠指标。

3　EGFR在NSCLC诊疗中的研究新进展

EGFR是近年来研究证实的参与NSCLC发病环节中的重要配体，多项研究均提示其在NSCLC发病中，具有促进肿瘤发生、发展及转移的作用［23］。根据这一理论研制的分子靶向药物是大部分NSCLC患者个体化治疗的最佳方案［24］，吉非替尼是目前临床常用的EGFR-TKI制剂之一，但大量临床研究提示其并不是对所有的NSCLC患者均有效［25］，对于EGFR基因突变阳性的患者疗效优于野生突变型［26］，表明分子靶向药物治疗有一定的适应范围，并不意味着所有患者均适合此种治疗，有研究提示既往无吸烟史的东北亚女性腺癌患者，接受分子靶向药物治疗后效果显著［27］，鳞癌及吸烟患者疗效较差［28］，这说明病理类型为腺癌及无吸烟史的患者是EGFR基因检测的适应人群，而目前关于NSCLC的治疗主要以手术、化疗及分子靶向药物联合治疗为主，多项研究均显示EGFR基因突变患者给予分子靶向药物治疗后，初期患者显示出良好的疗效，但是随着治疗周期的延长，NSCLC患者对靶向药物的反应性越来越差，以致后期出现无反应性［29］，这也提示EGFR基因可能存在变异及基因多态性，既往针对EGFR基因的单一发病途径而研制的受体酪氨酸激酶抑制剂在所有NSCLC患者的分子靶向治疗中疗效亦不尽人意。Amador等［30］在颈部肿瘤细胞株中EGFR基因的第一个内含子（CA-SSR）的多态性研究中发现携带长CA重复序列的细胞株往往对EGFR-TKI耐药，而短CA重复序列的细胞株则具有显著疗效，这可能与CA-SSR多态性能够影响EGFR的mRNA及蛋白表达水平，从而影响EGFR受体信号通路的活性有关［31］。关于EGFR-TK1耐药的机制已经被证实与特异性外显子20（T790M）、18、19、21突变，上皮间质转化因子（mesenchymal-epithelial transition factor，MET）原癌基因扩增及其蛋白过度表达等多个环节均有关［32］，而现有证据提示EGFR基因的多态性及耐药机制与NSCLC近期治疗效果显著相关［33］。邓沁芳等［34］对EGFR-TKI制剂耐药的基础研究发现，吉非替尼获得性耐药的肺腺癌菌株与亲代非耐药菌株相比，对铂类药物敏感性明显下降，而对多西他赛敏感性增强，即EGFR基因突变患者对铂类药物更加敏感［35］；而针对EGFR-T790M突变所致EGFR-TKI制剂耐药后的NSCLC治疗策略的研究显示，以紫杉醇为主的一线化疗效果较为明显，应避免使用铂类为基础的化疗方案［36］。尹延涛等［37］对70例晚期肺癌患者进行EGFR基因检测后观察其突变患者对铂类药物化疗的疗效，结果提示EGFR突变对于晚期NSCLC患者铂类化疗的近期疗效具有预测意义，突变阳性患者预后较好，并对以铂类为主的一线化疗及EGFR-TKI制剂更加敏感。化疗交替分子靶向药物联合治疗在EGFR检测阳性晚期NSCLC患者中具有显著疗效，且不会增加联合化疗药物的不良反应［38］。因此，EGFR基因检测不仅是分子靶向治疗的前提，也是常规铂类药物化疗疗效评价的指标［39］。

4　结语

随着人类分子生物学及基因遗传学的发展，肺癌的治疗由传统的手术及放化疗、免疫疗法进入分子基因精准治疗的新时代，EGFR基因是近年来研究证实与NSCLC发病密切相关的基因，其在大多数NSCLC患者中表达上调，是治疗NSCLC的一个重要靶点，根据其在NSCLC中的发病机制研发的EGFR-TKI是目前及未来NSCLC精准治疗的新途径，对NSCLC患者显示出较好的疗效，延长了患者的生存期，并提高了患者的生存质量，与传统治疗相比，具有特异性强、不良反应少的特点，其通过特异性转导途径抑制肿瘤细胞的增殖。然而靶向治疗有其自身的局限性，以EGFR基因为基础的分子靶向精准治疗并不是所有肺癌患者治疗的试金石，越来越多的证据表明EGFR基因存在多态性及突变性，使得部分患者靶向治疗的疗效并不理想，因此以EGFR基因检测为依据的靶向治疗是未来NSCLC精准治疗的前提和依据，是评判铂类药物化疗是否有效的指标，亦是NSCLC患者综合合理治疗的开端。

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R734.2

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10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.06.02

2016-02-17）

（corresponding author），邮箱：jiajinhu1982@163.com