秦智娟，杨晓清，张玉泉

·综述·

基因敲除在雌性小鼠生殖系统研究中的应用

秦智娟，杨晓清，张玉泉△

【摘要】基因敲除技术是20世纪80年代后半期应用DNA同源重组技术发展起来的，在对基因功能、发育生物学和疾病的研究中发挥了重要作用。直到现在，运用同源重组实现基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍最经典的方法。基因敲除动物模型中应用最广泛的是基因敲除小鼠模型。综述目前国内外实现基因敲除的几种重要方法以及利用同源重组实现的基因敲除技术在雌性小鼠生殖系统研究中的应用。这些应用主要包括研究性激素对生殖器官及激素依赖性疾病的影响、细胞分泌因子在发育期调控生殖器官组织的机制及胚胎形成后的性腺发育与成熟缺陷等。

【关键词】小鼠,基因敲除；泌尿生殖系统；DNA，重组；诱变，插入；RNA干扰

（J Int Reprod Health/Fam Plan，2016，35：51-55）

科学家们运用分子生物学方法改变动物体内某一特定基因制成基因敲除的动物模型，可以为人类探究疾病发病的分子机制、病理特征及诊疗方法等提供良好的实验模型。基因敲除的建立需要克服各种技术困难，如DNA的分离、质粒构建及同源重组效率等。过去比较熟悉的基因敲除方法有3种：同源重组法、插入突变法、RNA干扰（RNA interference，RNAi）法。近些年来一些创新性的基因敲除技术也备受国际关注，如锌指核酸酶（zinc finger nuclease，ZFN）基因打靶技术、转录激活因子样效应物核酸酶（transcription activator -like effector nucleases，TALENs）基因敲除以及一种全新的基因编辑技术CRISPR/Cas9 [clusteredregularly interspaced short palindromic repeats（CRISPR）/CRISPR-associated 9]。虽然基因敲除的方法多种，且近两年CRISPR/Cas9技术已被国外不少科学家视为未来承担细胞基因研究重任的领头羊，但目前为止用于研究基因生物学功能的小鼠基因敲除模型仍大多依赖同源重组法。……