刘　冲，　赵家敏，　杨龙君，　张　力

1山东省潍坊医学院附属医院胃肠外科，潍坊　261031

2中国人民解放军第八十九医院泌尿外科，潍坊　261021



胡椒碱抑制脂多糖活化的结肠腺癌细胞炎症因子IL-8的表达

刘冲1，赵家敏2，杨龙君1，张力1

1山东省潍坊医学院附属医院胃肠外科，潍坊261031

2中国人民解放军第八十九医院泌尿外科，潍坊261021

摘要：目的探讨胡椒碱抑制脂多糖(LPS)活化的结肠腺癌细胞炎症因子IL-8的表达及作用机制。方法胡椒碱对结肠腺癌细胞增殖作用的检测方法为WST-1法，采用流式微球捕获蛋白定量技术检测炎症因子(IL-8、IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α和IL-12p70)蛋白水平的表达，采用实时定量PCR法检测IL-8 mRNA的表达，采用Western blot法检测JNK和p38MAPK信号通路的活化水平。结果胡椒碱处理可剂量依赖性地抑制结肠腺癌细胞的增殖，且胡椒碱对结肠腺癌细胞的毒性相对较小；胡椒碱干预能够有效地抑制LPS活化的结肠腺癌细胞IL-8的分泌，且具有剂量依赖性；单纯胡椒碱处理后IL-8 mRNA表达水平非常低，而经过LPS处理后，IL-8 mRNA的表达水平显著提高，LPS干预后再经过胡椒碱处理结肠腺癌细胞IL-8 mRNA的表达水平又降低，表明胡椒碱对LPS活化的结肠腺癌细胞IL-8蛋白的表达是在转录水平控制的；LPS干预结肠腺癌细胞能有效地激活p38和JNK信号通路，且随着时间的延长，p-p38及p-JNK逐渐增高，具有时间依赖性，而LPS干预后经过胡椒碱处理，15 min后p38及JNK的磷酸化水平明显受到抑制，与单纯LPS干预组相比差异有统计学意义(P<0.05)，随着时间的推移，30 min时，p38和JNK的磷酸化抑制作用仍较显著(均P<0.05)，而到60 min时，p38和JNK的磷酸化抑制作用已经明显减弱(均P>0.05)，说明胡椒碱对p38和JNK的磷酸化具有明显的抑制作用。结论胡椒碱可能从转录水平上抑制LPS诱导的结肠腺癌细胞分泌促炎因子IL-8，即通过下调p38 MAPK和JNK信号通路上p38和JNK的磷酸化进一步降低IL-8的分泌，具体机制还有待于进一步阐明。……