荧光定量PCR在结核菌快速检测中的应用分析
2016-03-08杜安玲
杜安玲
(安阳市结核病防治所 河南 安阳 455000)
荧光定量PCR在结核菌快速检测中的应用分析
杜安玲
(安阳市结核病防治所河南 安阳455000)
目的探讨荧光定量PCR在结核菌快速检测中的应用效果。方法选取安阳市结核病防治所2014年6月至2014年12月就诊的100例呼吸系统疾病患者(临床阳性痰分离株100份),应用荧光定量PCR技术检测。结果荧光定量PCR检测准确率为97%,菌种鉴定特异性实验符合率为100%。结论结核菌快速培养法如荧光定量PCR技术经济、简单,结果可靠,特异度和敏感性均居较高水平,鉴别诊断能力较强,实验室可据自体条件对不同的检测方法进行选择。
结核菌;荧光定量PCR;快速检测
近年来,受多种因素影响,结核病发病率有上升表现,我国属结核病高负担国家,对公众生命安全构成了严重影响。结核病快速检测可为诊治提供依据,是加强防控效果的关键[1]。本次选取相关病例,依据需要,应用荧光定量PCR检测,现将相关内容总结如下。
1 资料与方法
1.1一般资料选取安阳市结核病防治所2014年6月至2014年12月就诊的100例呼吸系统疾病患者(痰液标本阳性),年龄20~60岁,平均(45.2±5.8)岁,男62例,女38例。
1.2检测方法应用荧光定量PCR试剂盒(美国原装进口)和荧光定量PCR仪;取受试对象清晨痰液,以等体积的NaOH(4%)加入,在室温下液化30 min,若溶液仍黏稠,取出部分痰液,再取4倍体积NaOH(4%)加入;在生物安全柜内将液化标本取出1 ml左右,12 000 r/min离心5 min,弃上清,重复操作,加入核酸提取液50 μl,混匀,使沉淀物悬浮,100 ℃置样管10 min,后放置4 ℃环境下冷却,离心2 min,吸取上清,将反应模板保存在4 ℃环境中。……
