吕 浩 黄 宣 张智熊 高红梅

（云南省红河州第一人民医院 云南 红河 661100）

流式细胞术是临床上对AL患者进行免疫分型的重要手段。传统的FSC/SSC 设门法无法准确地分辨出原始细胞与正常的成熟细胞。近年来，临床上通常使用CD45/SSC 设门法对急性白血病患者进行免疫分型。该方法是利用造血细胞CD45的表达量与细胞分化程度之间的关系来分辨原始细胞与正常的成熟细胞。为了提高对AL患者进行免疫分型的准确性，我院将该技术应用在AL患者的免疫分型中，取得了较理想的效果。现报告如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究的对象是2014年3月～2015年 4月期间笔者在长沙某医院进修时收集的初诊及从外院送检的76例AL患者。在这76例患者中,有男性患者40例，女性患者36例。他们的年龄在4～82岁之间，平均年龄为（53.2±6.7）岁。使用FAB分型标准对这些AL患者进行分型，其中，有19例M0/M1患者，有17例 M2患者，有11例M3患者，有4例 M4患者, 有9例M5患者，有8例M6患者，不明确具体分型的患者有8例。

1.2 试剂与仪器

本次研究使用的抗体为Beckman Coulter公司生产的CD45-PC5、MPO-F ITC/cCD79a-PE/cCD3-ECD、IgG1-FITC/IgG1-PE/CD45-PC5、CD3-FITC/CD19-PE/CD45-PC5三色荧光抗体。本次研究使用的溶血剂和破膜剂均购于CALTAG公司。本次研究使用的检测仪器为Beckman Coulter EPICSXL 型流式细胞仪。

1.3 检测方法

采集这76例患者的血液标本，将其放在EDTA抗凝管中。在100微升的血液样本中加入20微升的单克隆抗体，将其置于室温的环境中孵育，避免阳光对其进行直射，孵育的时间为15分钟。然后，在血液样品中添加溶血剂，对其中的红细胞进行溶解，并将血液样本放到离心机中进行离心处理，去掉血清，加入PBS液，对血液样品进行细胞内细胞因子的染色处理。……