周 萍， 樊 静， 梁

(成都大学 四川抗菌素工业研究所， 四川 成都 610052)

一种简易小鼠原代肝细胞分离方法

(成都大学 四川抗菌素工业研究所， 四川 成都 610052)

对小鼠原代肝细胞分离方法进行改良，通过简单且经济的方法获得小鼠原代肝细胞，采用4.5号输液针经下腔静脉逆行灌流，用长条状纸板对针进行固定，以获取质量稳定的小鼠原代肝细胞悬液.结果显示，改进后的方法灌流成功率高及重现性好并可获得实验所需肝细胞，细胞对台盼蓝拒染率>90%.方法操作简单，成本较低且效率较高.

灌流;小鼠原代肝细胞;Ⅳ型胶原酶

0 引 言

小鼠原代肝细胞是肝脏疾病及体外肝毒性研究的重要工具，探索一种简单且经济的小鼠肝细胞分离方法非常具有实际意义.相对于大型动物及人体原代肝细胞，小鼠原代肝细胞更经济且易获取.肝细胞的经典分离方法是Seglen两步原位灌注法[1]，该方法适用于大鼠以及较大动物肝细胞的分离.近年来，在Seglen两步原位灌注法基础上发展而来的适用于小鼠肝细胞分离方法有门静脉灌流[2]、下腔静脉灌流[3]、心脏逆行灌流[4].在实验中发现，因小鼠门静脉血管细小，壁薄易被输液针扎破而导致灌流失败或灌注不均匀较难穿刺并置管成功，但小鼠的下腔静脉血管比其门静脉血管粗，经下腔静脉的灌流方法比门静脉更易置管成功.文献报道的小鼠灌流多采用留置针及灌流泵，留置针的灌流采用手扶固定或胶带固定，容易出现针固……