杨江涛　庞伟民　王旭静　吕少溥　唐巧玲　王志兴中国农业科学院生物技术研究所, 北京 100081



陆地棉GhRACK1启动子的克隆与缺失分析

杨江涛庞伟民王旭静*吕少溥唐巧玲王志兴*
中国农业科学院生物技术研究所, 北京 100081

摘要:在基因工程发展中, 有应用前景的纤维特异表达启动子的缺乏是制约棉花纤维品质改良的主要因素之一。本研究利用反向PCR方法克隆到陆地棉纤维优势表达基因GhRACK1的上游启动子GhRACK1-P。GhRACK1-P全长为1987 bp, 含有TATA-box、CAAT-box、MYB2和I-box等顺式作用元件和调控元件。根据调控元件的分布对GhRACK1-P进行不同程度的缺失, 获得了p1、p2、p3和p4缺失体; 构建不同缺失体和全长GhRACK1-P的植物表达载体, 并通过农杆菌介导法导入烟草, 获得不同类型转基因烟草。GUS组织化学染色结果表明, 全长启动子GhRACK1-P只能驱动gus基因在转基因烟草的幼根及根毛中表达, 其他缺失体驱动gus基因在转基因烟草的花粉、叶片和根中表达, 为组成型表达启动子。由于根毛与棉花纤维具有相似的发育机制, 推测全长GhRACK1-P可能为纤维优势表达启动子。本研究结果为棉花纤维品质改良基因工程提供了新的调控元件。

关键词:纤维优势表达; GhRACK1启动子; 克隆; 缺失分析

本研究由国家转基因生物新品种培育重大专项(2014ZX08010-005)资助。

This study was supported by the National Major Project of Breeding for New Transgenic Organisms (2014ZX08010-005).

第一作者联系方式: E-mail: JT_Y1990@163.com

我国既是棉花生产大国, 也是原棉消费大国,棉花生产在国民经济中占有十分重要的地位。目前我国棉花纤维品质中等且单一, 虽然基本上可满足纺织业的要求, 但原棉品质不如美国和澳大利亚等产棉国, 缺乏国际竞争力。……