徐红超　陶静莉　许成杰　方　琦

广东医学院附属医院神经外科　广州　524001



MGMT VEGF在脑胶质瘤中的表达及临床意义分析

徐红超陶静莉许成杰方琦

广东医学院附属医院神经外科广州524001

【摘要】目的分析MGMT、VEGF在脑胶质瘤中的表达及临床意义。方法270例脑胶质瘤患者为肿瘤组，行颅脑外伤手术治疗的250例患者为对照组。取肿瘤组患者脑胶质瘤标本及对照组正常脑组织标本，检测MGMT、VEGF的阳性表达率。同时，统计并对比分析肿瘤组患者不同病理分级、肿瘤类型生存质量及预后下MGMT和VEGF的阳性表达率。结果肿瘤组患者MGMT和VEGF的阳性表达率依次为68.52%、77.78%，对照组依次为12%、28%，2组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。肿瘤组患者在MGMT和VEGF的阳性表达率上，高级别胶质瘤组患者高于低级别胶质瘤组(P<0.05)；KPS≤70分组患者高于KPS≤70分组(P<0.05)；术后12个月内死亡组患者高于术后12个月后存活组(P<0.05)。而不同类型胶质瘤组患者中，MGMT和VEGF的阳性表达率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。结论MGMT、VEGF的表达与脑胶质瘤的发生、发展密切相关，可作为脑胶质瘤治疗效果评价、病情判断及生存质量、预后评估的重要参考依据。

【关键词】脑胶质瘤；MGMT；VEGF

脑胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤类型，占40%～60%，因具有侵袭性生长、无控性增值等特点而成为人类肿瘤死亡的重要原因[1]。近年来，尽管在手术联合放化疗等综合治疗措施下，脑胶质瘤患者的预后仍未得到明显的改善。而随着临床肿瘤医学对肿瘤疾病发病机制研究的不断深入以及分子生物学研究的显著进展，一些新型细胞因子及生物标志物的不断研发，为肿瘤疾病的治疗及预后评估提供了新的参考依据。据相关研究报道指出，DNA修复酶——O(6)-甲基鸟嘌呤- DNA甲基转移酶(MGMT)与胶质瘤的发生密切相关，且在胶质瘤组织中的阳性表达是造成肿瘤耐药性升高的重要原因[2]。因此，该指标可能是预测肿瘤治疗效果及患者预后的重要参考指标。血管内皮生长因子(VEGF)则在肿瘤疾病的发生、发展中机制中发挥了重要的参与作用，同样是评估肿瘤患者病情及预后的有效指标。本文主要探讨MGMT、VEGF在脑胶质瘤中的表达及临床意义，以期为该病的治疗、病情及预后评估提供参考依据。

1资料和方法

1.1临床资料选择我院2010-01-2013-10收治的270例脑胶质瘤患者为肿瘤组，所有患者均经手术病理确诊。男160例，女110例；年龄30～75岁，平均(53.5±6.2)岁；WHO病理分级Ⅰ级30例，Ⅱ级80例，Ⅲ级100例，Ⅳ级60例；肿瘤类型：星形细胞瘤110例，少枝胶质细胞瘤80例，少枝星形细胞瘤50例，多形性胶质母细胞瘤30例。另选择于我院行颅脑外伤手术治疗的250例患者为对照组，男150例，女100例；年龄30～75岁，平均(54.7±5.8)岁。所有研究对象均自愿签署伦理学知情同意书。2组性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2方法(1)主要仪器及试剂：主要仪器：石蜡切片机，石蜡自动脱水机，光学显微镜及其成像系统，烤箱，孵箱；主要试剂：浓缩型鼠抗人MGMT单克隆抗体，兔抗人VEGF单克隆抗体，通用型SP广谱试剂盒，PBS缓冲溶液，DAB显色试剂盒。(2)标本采集：肿瘤组患者组织标本为手术切除的脑胶质瘤标本，对照组患者组织标本为颅脑外伤手术切除的正常脑组织标本。(3)MGMT、VEGF表达检测：MGMT、VEGF表达的检测采用免疫组织化学染色法。首先，肿瘤组患者肿瘤组织和对照组正常脑组织切除后，采用10%中性甲醛组织将标本用固定，常规石蜡包埋。4 μm切片连续5张，烘烤、脱蜡、脱水后，放置于枸橼酸盐缓冲液中予以组织抗原修复，PBS冲洗3次。滴加一抗，孵育过夜；再滴加二抗，3%双氧水室温孵育。再次予以PBS冲洗3次，每张切片予以DAB显色液滴加，苏木精对比复染，酒精脱水，二甲苯透明，中性树脂封固。用PBS液代替一抗作为阴性对照，采用结肠癌的组织切片作阳性对照。

1.3免疫组化染色结果判定标准MGMT以光学显微镜下细胞浆或细胞核呈棕褐色为阳性细胞判断标准，VEGF以细胞质呈棕黄色为阳性细胞判断标准。参照Krajewska法进行半定量分析：高倍镜(×400)下随机抽取5个视野进行阳性细胞计数，计算阳性细胞率，并予以分级：0级：比率<5%；1级：比率5%～25%；2级：比率25%～50%；3级：比率50%～75%；4级：比率>75%。然后，染色强度评价标准：阴性：0级；1级：弱阳性；2级：阳性；3级：强阳性。最后，以阳性细胞率级别×软色强度级别/2≥0.5判断MGMT及VEGF为阳性表达[3]。

1.4观察指标

1.4.12组患者脑组织标本MGMT和VEGF的阳性表达率：根据检测结果，统计2组患者脑组织标本MGMT和VEGF的阳性表达率。

1.4.2肿瘤组患者不同病理分级及肿瘤类型下MGMT和VEGF的阳性表达率：根据肿瘤组270例患者的WHO病理分级及肿瘤类型，统计不同病理分级及肿瘤类型下MGMT和VEGF的阳性表达率。

1.4.3肿瘤组患者不同生存质量及预后下MGMT和VEGF的阳性表达率：术后观察随访12个月，采用生存质量评分量表(KPS)进行评分。KPS>70分，提示患者可正常生活；KPS≤70分，提示患者缺乏正常生活能力。同时，观察术后12个月后患者的预后情况。统计不同生存质量及预后下MGMT和VEGF的阳性表达率。

1.5统计学方法采用SPSS 20.0统计软件，计数检测数据以率的形式表示，2组间比较采用用χ2检验，多组间比较采用卡方检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.12组患者脑组织标本MGMT和VEGF的阳性表达率比较肿瘤组患者MGMT和VEGF的阳性表达率依次为68.52%(185例)、77.78%(210例)，对照组依次为12%(30例)、28%(70例)，2组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。

2.2肿瘤组患者不同病理分级、肿瘤类型生存质量及预后下MGMT和VEGF的阳性表达率比较表1可以看出，在MGMT和VEGF的阳性表达率上，高级别胶质瘤组患者高于低级别胶质瘤组(P<0.05)；KPS≤70分组患者高于KPS≤70分组(P<0.05)；术后12个月内死亡组患者高于术后12个月后存活组(P<0.05)。而不同类型胶质瘤组患者中，MGMT和VEGF的阳性表达率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

表1　肿瘤组患者不同病理分级、肿瘤类型生存质量及

3讨论

3.1MGMT在脑胶质瘤中的表达及临床意义目前，烷化剂类化疗药物是脑胶质瘤临床治疗的有效药物之一，尤其是替莫唑胺，作为一种新型烷化剂，能够在体内经代谢与DNA鸟嘌呤形成六氧-甲基鸟嘌呤(O6-MeG)，造成DNA蓄积性损伤，最终导致肿瘤细胞死亡而发挥抗肿瘤作用，为NCCN指南所推荐的治疗胶质瘤的一线化疗药物[4]。而MGMT为一种独特的DNA修复酶，在DNA的损伤修复中发挥着独特的作用。据相关临床研究报道证实，因MGMT在肿瘤细胞的中过表达，可将细胞DNA上的O6-MeG移去，对肿瘤细胞起到保护作用而免受烷化剂的损害，进而导致肿瘤细胞对替莫唑胺产生耐药，成为制约胶质瘤化疗治疗效果的重要因素[5]。本研究中，肿瘤组患者MGMT的阳性表达率高于对照组，与文献报道一致[6]。提示MGMT可能在脑胶质瘤的发生机制中发挥了重要的作用，而这一具体作用机制尚需进一步研究。同时，本研究结果显示，在MGMT的阳性表达率上，高级别胶质瘤组患者高于低级别胶质瘤组，KPS≤70分组患者高于KPS≤70分组，术后12个月内死亡组患者高于术后12个月后存活组。提示MGMT的阳性表达与脑胶质瘤的病理分级、生存质量及预后密切相关，可作为患者临床治疗效果评价、病情判断及预后评估的重要参考依据[7]。

3.2VEGF在脑胶质瘤中的表达及临床意义VEGF作为最重要的血管生长刺激因子，通过增加微血管通透性，能够促进血管内皮细胞增殖，进而为肿瘤组织的生长提供养分，在肿瘤的发生、发展中发挥着重要的促进作用[8]。本研究中，肿瘤组患者VEGF的阳性表达率高于对照组，与文献报道结果一致[9]。同时，在VEGF的阳性表达率上，高级别胶质瘤组患者高于低级别胶质瘤组，KPS≤70分组患者高于KPS≤70分组，术后12个月内死亡组患者高于术后12个月后存活组。表明VEGF的表达与脑胶质瘤的发展及预后密切相关，VEGF的高表达反映了脑胶质瘤不良的生物学行为，阳性表达率越高，提示脑胶质瘤侵袭性强、破坏性大，患者病情越严重，预后越差，可为患者病情的判断及预后的评估提供指导意义。

综上，MGMT、VEGF的表达与脑胶质瘤的发生、发展密切相关，可作为脑胶质瘤治疗效果评价、病情判断及生存质量、预后评估的重要参考依据。

4参考文献

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(收稿2015-03-12)

【中图分类号】R739.4

【文献标识码】A

【文章编号】1673-5110(2016)02-0041-03