林文远　朱春江　刘冯　陈蓓莉　农庆伟　吴贤义

摘要：目的：探讨盐酸普鲁卡因对体外培养的人白血病HL-60细胞ID4基因甲基化状态的影响。方法：体外培养HL-60细胞，使用不同浓度（2 mmol/L、4 mmol/L、6 mmol/L）的普鲁卡因处理细胞，分别采用MS-HRM、RT-PCR法检测HL-60细胞ID4基因启动子区域的甲基化状态和ID4mRNA的表达。结果：HL-60细胞ID4基因在普鲁卡因作用下呈现明显的去甲基化状态，ID4mRNA表达明显增加，且以上改变均随药物浓度的增加而增强（P<0.05）。结论：盐酸普鲁卡因对HL-60细胞的ID4基因启动子区域有去甲基化作用，上调细胞ID4 mRNA的表达。

关键词：盐酸普鲁卡因；ID4基因；甲基化；HL-60细胞

中图分类号：R733.7 文献标志码：A 文章编号：1008-2409（2016）05-0012-05

白血病是一类造血干细胞来源的恶性克隆性血液系统疾病，其发病机制尚不十分明确。研究认为DNA异常甲基化是血液系统恶性疾病发生、发展的重要机制之一，尤以抑癌基因的高甲基化最为重要。DNA结合抑制因子4（inhibitor of DNA binding，ID4）是一种新型的抑癌基因，其启动子区域异常甲基化可致使该基因的表达沉默，并失去其抑癌作用，从而导致白血病的发生。盐酸普鲁卡因作为一种非核苷类去甲基化药物，能够使已发生甲基化的CPG岛去甲基化，从而使沉默的抑癌基因重新表达，抑制肿瘤细胞增殖，促使其凋亡，进而达到治疗肿瘤的目的。本研究主要是体外观察盐酸普鲁卡因在不同浓度时人类白血病HL-60细胞ID4基因的甲基化状态及ID4 mRNA表达的变化，探讨普鲁卡因对HL-60细胞ID4基因甲基化状态的影响，为急性白血病的去甲基化治疗提供新的思路。

1材料与方法

1.1主要材料及来源

人类白血病HL-60细胞株购自中国科学院上海细胞库；……