毛根林, 解　云, 赵俊龙, 陈　炎, 徐汉虹, 林　菲

(华南农业大学 农学院/天然农药与化学生物学教育部重点实验室， 广东 广州 510642)



葡萄糖基氟虫腈处理下蓖麻内参基因的稳定性分析

毛根林, 解云, 赵俊龙, 陈炎, 徐汉虹, 林菲

(华南农业大学 农学院/天然农药与化学生物学教育部重点实验室， 广东 广州 510642)

摘要：【目的】筛选葡萄糖基氟虫腈(GTF)及溶剂二甲基亚砜(DMSO)处理下蓖麻Ricinuscommunis稳定的内参基因，为研究GTF的韧皮部装载机制提供参考。【方法】选取Actin，ARC，ef1a，SamDC，TUA6为内参基因，通过实时荧光定量PCR分析基因表达量并利用geNorm，NormFinder，BestKeeper，Delta CT软件及RefFinder在线分析工具综合比较不同时间和不同浓度的GTF与DMSO处理后，5个候选内参基因在蓖麻幼苗子叶中表达的稳定性。【结果】各软件分析得出的内参基因稳定性排名依次为geNorm：Actin=ef1a>SamDC>ARC>TUA6；NormFinder：SamDC>ARC>Actin>ef1a>TUA6;BestKeeper：Actin>ef1a>SamDC>ARC>TUA6；Delta CT：SamDC>Actin>ARC>ef1a>TUA6; RefFinder：Actin>SamDC>ef1a>ARC>TUA6，而单独分析DMSO处理时，稳定性排名则为：ef1a>SamDC>Actin>TUA6>ARC。【结论】综合分析GTF和DMSO处理，Actin的表达最稳定；在DMSO处理下，则ef1a最为稳定。

关键词：蓖麻； 葡萄糖基氟虫腈； 二甲基亚砜； 实时荧光定量PCR； 内参基因； 稳定性

农药施用减量增效要求在减少农药施用量的同时提高农药的使用效率，降低农药残留，保证食品安全，这也是当前农药研究者共同努力的方向。徐汉虹等[1]提出的“导向农药”理念完美契合农药减量增效的目的，对保障食品安全具有非常重要的意义。导向农药能够在植物内源转运蛋白的作用下定向积累至病虫为害部位，它的作用方式可以分为2种：一是当植物受到危害时，导向农药分子能够被植物应激反应产生的酶消解并释放出农药母体分子作用于靶标；二是具有农药活性的导向分子直接作用于靶标从而达……