王立梅,孙玉珠,王　丹

(哈尔滨维科生物技术开发公司，哈尔滨 150069)



猪丹毒的人工主动免疫

王立梅,孙玉珠,王丹

(哈尔滨维科生物技术开发公司，哈尔滨 150069)

猪丹毒是猪丹毒杆菌引起的一种急性热性传染病，其主要特征为高热、急性败血症、皮肤疹块(亚急性)、慢性疣状心内膜炎及皮肤坏死与多发性非化脓性关节炎(慢性)。目前集约化养猪场比较少见，但仍未完全控制。本病自有研究机构研究了利用毒力减弱的丹毒杆菌制造菌苗，进行抗猪丹毒的免疫以后，各国学者提出了很多方法，归纳起来，可以分为以下三类：弱毒活菌苗免疫、免疫血清和强毒活菌共同注射免疫、灭活菌苗免疫。本文对其进行了详细的介绍。

猪丹毒；菌苗；培育；免疫

1　弱毒活菌苗免疫

我国在弱毒菌苗方面的研究：①GC42弱毒菌种：哈尔滨兽医研究所培育成功可供注射及口服免疫的GC42弱毒菌种是用该所培育的G370(豚鼠系)通过雏鸡继代育成的。仅取其42代(简称GC42)，作为制苗的菌种，有较好的安全性与免疫原性。以大剂量的活菌500亿皮下接种或口服，试验猪没有任何临床症状；以1000万个活菌皮下接种小鼠或猪，攻毒后的平均保护率为90%以上。本菌种连续在猪体通过5代，毒力仍然不变，有较好的稳定性。免疫持续期按规程确定为6个月。本菌种也可作为口服，是一株安全稳定及免疫原性较好的弱毒菌种，从1976年开始在我国各兽医生物药品厂生产，并推广应用。②GC42弱毒菌种：是江苏省农业科学院与南京药械厂协作培育而成。其基础菌株是哈尔滨兽医研究所的G370，通过含有0.01%锥黄素鲜血琼脂斜面继续传40代，经过菌落的选择，再通过0.04%锥黄素鲜血琼脂斜面继续传10代后，以10亿活菌皮下接种小鼠，平均存活率为93.5%；500亿活菌皮下接种猪，没有任何临诊的不良反应。100万活菌皮下接种小鼠或猪，攻毒后的保护率为100%。6个月的免疫持续期保护率为96.34%。本菌种连续通过猪体5代，在鲜血琼脂斜面上继续传50代，其安全性与免疫原性没有发生变化，本菌种称为G4T(10)，也是一株毒力稳定、安全性与免疫原性较好的猪丹毒弱毒菌种。此外，兽医药品检查所培育的T60-10弱毒菌种，安全性与免疫原性较好，也是一株较有希望的弱毒菌种。③猪的三联苗与二联苗：1974-1977年，由兽医药品检查所、哈尔滨兽医研究所、江苏农业科学和南京、郑州、成都、兰州等兽医生物药品厂7个单位协作研究，以猪丹毒GC42菌种，猪肺疫EO630菌种与猪瘟免化毒按一定的工艺制造三联苗(或二联苗)，对猪皮下或肌肉注射1mL，即可预防猪的三大烈性传染病，颇受基层防疫人员和群众的欢迎。

江苏省农业科学院与南京药械厂协作以猪丹毒弱毒菌种G4T(10)Z制成联苗，并已经过大规模的区域试验，在各地农村使用，获得较好的防疫效果。

巴斯德一杜伊埃氏弱毒菌苗，连续通过兔体后，对兔的毒力逐渐增强，但对猪的毒力逐渐减弱；于是，从一系列的对猪具有不同毒力的菌株中，选择了二株用以制造菌苗，其中之一毒力较弱的称为第一号菌苗，注射猪后不引起严重反应，但可以使猪获得一定免疫力，以抵抗毒力较强的第二号菌苗的注射。第一号及第二号菌苗的使用剂量均为1/8mL,皮下注射，二次注射的间隔时间为12天，免疫期可达1年以上，但也有的报告仅为3～5个月的。这种菌苗虽然证实有效，也曾被很多国家采用，但各地使用的结果并不相同，对于感受性较大的猪种，往往引起严重反应和死亡，死亡率有时高达5%～10%，近年来也逐渐被其他较好的菌苗所代替。

近藤正-杉村克治氏弱毒菌苗，近藤等将猪丹毒杆菌接种于含锥黄素的固体培养基上，经多次移植传代获得毒力减弱的菌株，注射小鼠亦不死亡，但仍具有免疫原性，逐用以制造菌苗。这种菌苗在日本使用的结果，认为效力良好，并曾被其他国家采用。菌苗的使用剂量为2～5mL，免疫期约半年，但也有免疫2～3个月仍感染猪丹毒的。

2　血清和强毒活菌共同注射免疫

抗猪丹毒血清和猪丹毒强毒菌液共同注射的免疫方法是国外学者提出的；系利用猪丹毒免疫血清所产生的被动免疫力以防止强毒菌的危害，同时又利用强毒菌刺激机体使其产生主动免疫力，以弥补被动免疫期短的缺点。

3　灭活菌苗免疫

很多学者曾试图制造一种死菌苗(或称灭活菌苗)进行对猪丹毒的免疫。由兽医药品监察所、华东农业科学研究所和南京、成都、郑州等3个兽医生物药品厂共5个单位曾集体研究，用多种培养基和不同方法所制菌苗的效力检定结果表明，以肉肝胃酶消化汤不加血清的培养基也可制出效力良好的氢氧化铝菌苗，对小鼠、鸽及猪均属安全有效。此菌苗于1956年开始投产，在全国范围内推广应用。

另外，兽医药品监察所与成都兽医生物药品厂制成的猪丹毒半固体菌苗有良好的效力。后又仿Trau法制成的猪丹毒吸附菌苗，接种剂量5mL，免疫持续可达6个月。

有人用加有0.25%琼脂的肉汤培养物，并以0.3%的福尔马林杀菌48h制成的半圆体菌苗，对鸽及猪有相当好的免疫效果；这种菌苗曾在苏联大量的使用。还有用含10%马血清的肉汤培养猪丹毒杆菌，加氢氧化铝吸附后沉淀，吸弃上清液使之浓缩为1/4，猪丹毒杆菌用稀碱溶液处理，加0.1%皂角苷及0.002%硫柳汞制成的菌苗，有良好的免疫效力。

2015-12-23

王立梅(1986-),女,大专,助理兽医师。

S858.28

B文章编号：2095-9737(2016)04-0184-01