袁忠涛，卿 晨，李晓进，张学美，史明霞，黄 颖，李惠民△

(1．昆明医科大学第一附属医院血液科 650032；2.昆明医科大学药学院暨重点实验室 650500； 3.昆明医科大学第四附属医院血液科 650021)

神经元特异性烯醇化酶和U266细胞株对破骨样细胞作用的研究*

袁忠涛1，卿 晨2，李晓进3，张学美1，史明霞1，黄 颖1，李惠民1△

(1．昆明医科大学第一附属医院血液科 650032；2.昆明医科大学药学院暨重点实验室 650500； 3.昆明医科大学第四附属医院血液科 650021)

目的 探讨神经元特异性烯醇化酶(NSE)和人多发性骨髓瘤细胞U266对人破骨样细胞(OLC)功能的影响。方法 采用正常人外周血单个核细胞加用细胞核因子κB受体激治蛋白配体(RANKL)+巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的方法诱导培养OLC；实验分3组，NSE组：将6孔培养板中培养14 d的OLC，分别加入100 ng/mL重组人NSE培养24、48、72 h；共培养组：将6孔Transwell小室下室中培养14 d的OLC，各上室分别加入1×105/孔U266细胞进行共培养24、48、72 h；对照组：单独培养的OLC。通过实时荧光定量PCR比较 NSE和U266细胞株对OLC的RANKL、扩胃蛋白(OPG)、IL-6和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP) mRNA转录水平的影响。结果 共培养组、NSE组和对照组RANKL、OPG、IL-6 mRNA在OLC均不表达；与对照组相比，共培养组、NSE组的TRAP mRNA表达水平升高，差异有统计学意义(P<0.01)；TRAP mRNA表达水平的升高尤其以48 h和72 h明显。结论 本试验中OLC表达TRAP，NSE是促进骨髓瘤骨病中OLC分化和成熟的因素，提示NSE能增强OLC的活性。

磷酸丙酮酸水合酶；骨髓瘤骨病；破骨细胞；酸性磷酸酶

骨髓瘤骨病(myeloma bone disease,MBD)是影响多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者生存质量和预后的主要因素[1]，MBD的发生、发展是多因素作用的结果，MM细胞活化破骨细胞(osteoclast,OC)，抑制成骨细胞(osteoblast,OB)活性，导致骨代谢失衡是其主要的病理生理机制，其中OC为主要的效应细胞[2]。细胞核因子κB(NF-κB)受体激活蛋白(receptor activator of nuclear factor κB，RANK)/NF-κB受体激活蛋白……