杜兵兵



第二代高通量测序技术的原理及其在医学中的应用进展

杜兵兵

【摘要】第二代高通量测序技术近年来取得了较快发展，与第一代测序技术相比具有速度快、准确率高、成本低等优点，主要包括454测序技术、Solexa测序技术以及SOLID测序技术。高通量测序技术在医学领域的研究越来越广泛，本文介绍了几种高通量测序技术的作用原理以及它们在临床方面的应用情况。

【关键词】高通量测序技术；454测序技术；Solexa测序技术；SOLID测序技术；临床应用

2005年Nature首次报道了454公司最新的基于微乳液PCR技术的高通量测序技术[1]，之后全球各个科研机构和生物公司相继开展高通量测序技术的研究工作。在这些竞争中脱颖而出的有罗氏公司的454测序、Illumina公司的Solexa测序以及ABI公司的SOLID测序[2]，它们逐渐成为新一代高通量测序技术的代表者。这些测序技术已经越来越广泛地应用于医学领域，主要运用于肿瘤、病原生物学等的预防、检测及治疗，成为临床研究领域的重要技术手段。

1　第二代高通量测序的原理

1.1454高通量测序

454高通量测序是一种依靠生物发光进行DNA序列分析的新技术。根据样品种类和实验目的，将DNA文库固定在相应的捕获磁珠上，形成油包水混合物，接着经过乳液PCR扩增形成单分子多拷贝的分子簇．随后将乳液体系里释放出来的磁珠放入VFP板的小孔进行后续的测序，对每个小孔中的DNA片段分子进行准确快速的碱基序列分析[3]。454测序成本较高，限制了该平台的市场化普及。……