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草珊瑚叶片总RNA提取方法及效果的比较研究

2016-02-16沈少炎谢德金吴玉香荣俊冬何天友陈礼光郑郁善

浙江林业科技 2016年5期
关键词:植物检测方法

沈少炎,谢德金,吴玉香,荣俊冬,何天友,陈礼光,郑郁善,*

(1.福建农林大学 园林学院,福建 福州 350002;2.福建农林大学 林学院,福建 福州 350002)

草珊瑚叶片总RNA提取方法及效果的比较研究

沈少炎1,谢德金2,吴玉香1,荣俊冬2,何天友1,陈礼光2,郑郁善1,2*

(1.福建农林大学 园林学院,福建 福州 350002;2.福建农林大学 林学院,福建 福州 350002)

采用CTAB法、CTAB-LiCl法、CTAB-Trizol法、Trizol法、天根RNA提取试剂盒及百泰克RNA提取试剂盒提取草珊瑚(Sarcandra glabra)叶片总RNA,并通过微量紫外分光光度计、电泳检测等对提取的结果进行了分析比较。结果表明:CTAB-LiCl法和天根RNA提取试剂盒比较适合提取草珊瑚叶片的总RNA。这两种方法提取的总RNA的完整性和纯度较高,无明显的蛋白质及其他杂质污染,OD260/OD280的值在1.9~2.1,OD260/OD230在2.0~2.4。获得质量高、完整性好、纯度高的总RNA,为后续构建cDNA文库以及相关基因的克隆提供了试验基础。

草珊瑚;RNA提取;CTAB-LiCl法;天根RNA提取试剂盒

草珊瑚(Sarcandra glabra) 是金粟兰科(Chloranthaceae)草珊瑚属(Sarcandra)[1],多年生常绿草本或亚灌木,又名观音茶、接骨木等[2],是我国传统的中药材。草珊瑚全株可入药。现代药理学研究发现草珊瑚具有抗菌消炎、抑制流感病毒、促进骨折愈合以及抗肿瘤等药效和生物活性[3~5]。利用分子生物学研究我国传统中草药已经成为当今科研工作的趋势。但是,关于草珊瑚分子生物学方面的探索才刚刚开始,包括如cDNA文库的构建、RNA印迹表达、基因克隆和基因表达分析等都是草珊瑚分子生物学研究的重要课题,开展这些研究的关键是提取高质量的总RNA。关于植物总RNA提取方法及其改良……

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