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肉桂酸锗对小鼠S180瘤Ki-67表达的影响

2016-02-06

现代养生·下半月 2016年10期
关键词:肉桂酸低剂量免疫组化

林 波

江苏护理职业学院 江苏省淮安市 223300

肉桂酸锗对小鼠S180瘤Ki-67表达的影响

林 波

江苏护理职业学院 江苏省淮安市 223300

目的:探讨肉桂酸锗对小鼠S180瘤细胞增值活性的影响。方法:建立小鼠S180移植瘤模型,应用肉桂酸锗灌胃给药后,通过免疫组织化学观察肿瘤细胞的Ki-67的表达情况。结果:观察肉桂酸锗各剂量组瘤细胞较NS组变化明显,肉桂酸锗高、中、低剂量组阳性表达率分别为70%、60%、70%,CTX组为60%,均低于NS组(90%)与NS组比较明显降低(P<0.05)。结论:肉桂酸锗能明显抑制S180移植瘤的Ki-67的表达。

肉桂酸锗;增值活性;Ki-67

1 实验材料和方法

荷瘤小鼠模型的建立 取传代接种后7-8天生长良好的S180腹水瘤源小鼠,无菌条件下从腹腔抽出瘤液(经台盼蓝染色法检验瘤细胞活性>95%),用灭菌生理盐水调整瘤细胞数至4.0X107/ml,每鼠右前腋皮下接种0.2ml瘤细胞悬液,形成实体瘤。将接种了S180瘤的小鼠随机分为5组,每组10只,分别为生理盐水阴性对照组(NS组)、环磷酰胺阳性对照组(CTX组)(2.5mg/ ml)和肉桂酸锗实验组(低、中、高剂量组),其中低剂量组为0.1 mg/ml、中剂量组为0.2 mg/ml、高剂量组为0.4 mg/ml。接种次日同时灌胃给药,给药量 0.2ml/20g,每日给药一次,连续10日,停药次日断椎处死,解剖剥离皮下瘤体。

2 实验结果判定

2.1 染色结果评定标准

Ki-67阳性表达定位于肿瘤细胞的细胞核。对免疫组化结果,采用半定量计分法判定,即根据阳性肿瘤细胞所占比例和染色强度进行综合评分。双人双盲法观察切片,拍照留取典型免疫组化照片。每个标本切片中选高倍(40×10)视野5个,以该视野内阳性细胞百分数的均值作为该标本的阳性细胞百分数。

2.2 染色评定结果

Ki-67免疫组化标记结果显示,NS组阳性率最高,达90%,CTX组60%,肉桂酸锗实验组阳性表达率分别为70%、60%、70%,与NS组比较明显降低(P<0.05)。(见表1)。

表1:各组瘤组织中Ki-67表达的比较

3 讨论

1983年,Gerdes等发现在增殖细胞中有一种特殊的核抗原表达,且此种抗原在细胞分裂期表达增加,于M期达高峰, 而度过分裂周期后迅速下降,这就是Ki-67。研究表明,Ki-67 能够可靠而迅速地反映恶性肿瘤细胞的增殖率, 其表达的高低对评价多种恶性肿瘤细胞的增殖状态、生物学行为都具有重要意义 。邱胡越等[1]在对ER阳性且HER-2阴性乳腺癌的研究中发现,Ki-67在该种肿瘤复发组的阳性率较高,预后差。而非复发组的阳性率较低,说明Ki-67的表达与肿瘤的生物学行为密切相关。庞旭峰[2]报道肝细胞癌P53和Ki-67蛋白表达与肝切除术后预后关系密切,有助于肝癌术后预后的判断。癌基因的检测及增殖细胞核抗原的检测对判断该肿瘤生物学行为有意义。目前已成为评价细胞增殖活性的特异性指标。

本实验应用免疫组化S-P法,对Ki-67蛋白进行免疫组化标记,检测其与各实验组肿瘤组织细胞增殖情况的关系。结果显示,肉桂酸锗高、中、低剂量组Ki-67表达率分别为70%,60%,70%,与NS组比较,具有显著性差异(P<0.05)。说明肉桂酸锗可能通过抑制肿瘤细胞的分裂而起到抑制肿瘤生长的作用。

[1]胡越,贾卫娟,谭翠,顾然,杨雅平,刘凤桃,苏逢锡.Ki-67、PgR在ER阳性且HER-2阴性乳腺癌Luminal分型中的意义[J].岭南现代临床外科,2016(02).

[2]庞旭峰.肝细胞癌P53和Ki-67蛋白表达与肝切除术后预后的关系[D].青岛:青岛大学,2012.

[3]高绍仪.氯基酸堵氧化物的药物活性[J].世界医学信息(有机锗专辑),1990:47-54.

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