李茂菲，周 婧，姚攀锋，赵学荣，李成磊，吴 琦

(四川农业大学 生命科学学院，四川雅安 625014)



苦荞糖基转移酶基因的克隆及活性鉴定

李茂菲，周 婧，姚攀锋，赵学荣，李成磊，吴 琦*

(四川农业大学 生命科学学院，四川雅安 625014)

糖基化修饰在调控各种小分子的溶解度、稳定性及生物活性中具有重要的作用。该研究基于苦荞转录组数据，克隆获得2条糖基转移酶基因(FtUFGT4和FtUFGT5)，并对其在大肠杆菌中的表达产物进行酶催活性鉴定。结果表明：(1)获得的苦荞糖基转移酶基因cDNA分别为1 434和1 470 bp，其编码蛋白同属于拟南芥糖基转移酶E类群，可能参与黄酮类化合物的糖基化。(2)多重序列比对表明，FtUFGT4和FtUFGT5蛋白C端都具有PSPG框，其催化活性位点分别是H17和H16；FtUFGT4和FtUFGT5都是典型的植物糖基转移酶GT-B结构，二者的蛋白模型能与矢车菊素和UDP进行分子对接。(3)FtUFGT4和FtUFGT5在大肠杆菌中获得了可溶性表达，薄层层析实验表明二者均具有催化矢车菊素糖基化为矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的活性。

苦荞；UDP-糖基转移酶；基因克隆；活性鉴定

植物次生代谢产物的结构多样性是由于植物在长期进化过程中对生态环境产生化学适应的结果，具有防御病原微生物，吸引传粉、固氮和防紫外线等多种功能[1]。植物次生代谢产物种类繁多，结构迥异，包括酚类化合物、萜类化合物和含氮有机碱等在内的小分子化合物动态地调节了植物细胞内的平衡。为应对外界环境的复杂变化，植物体内经常发生小分子修饰作用赋予了其更大的灵活，从而形成了植物次生代谢产物的多样性。……