朱文渊，郝晴晴，霍翠梅，吕玉星

（济宁市畜牧兽医局，山东济宁 272037）

仔猪流行性腹泻病毒原性调查研究

朱文渊，郝晴晴，霍翠梅，吕玉星

（济宁市畜牧兽医局，山东济宁 272037）

通过济宁市仔猪流行性的发病情况，找出主要致病因子，对该地区36家猪场的134份病样，进行了猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪圆环病毒-2（PCV-2）、猪伪狂犬病毒（PRV）荧光RT-PCR检测。结果显示：PEDV、TGEV、PCV-2、PRV阳性率分别为73.9%、17.9、21.6% 和20.1%，群阳性率分别为83.3%、27.8%、33.3%和25.0%。研究表明：引起仔猪腹泻流行的主要致病因子为PEDV，并伴随TGEV、PCV-2、PRV的混合感染。

养殖 仔猪 流行性腹泻 病毒原性

仔猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea，PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的一种以腹泻、呕吐和脱水为主要特征的接触性肠道传染病［1］。各年龄的猪均可能发病，对哺乳仔猪影响较大，致死率常能达到100%。

临床上，造成仔猪腹泻发生的原因是多方面的，如猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪轮状病毒（PRV）、猪伪狂犬病毒（PRV）等，且多以混合感染呈现［2～4］。2015年秋冬季节，济宁市地区仔猪流行性腹泻呈暴发趋势。此次疫情多在中小型养殖场发生，发病快，死亡率高，出生后到断奶的仔猪死亡率高达70%以上，对该市生猪养殖业造成了巨大损失。为了解济宁市仔猪流行性腹泻的发病情况，找出致病原因，研究通过荧光RT-PCR检测方法，对采自济宁市36家养猪场的134份病料进行了4种病毒原性检测。

1 材料与方法

1.1 病料采集

剖检病弱或刚刚死亡的仔猪，采集明显发病的小肠、胃、肺、肾脏作为检测样本，实验室-40℃冻存，以备检测。

1.2 主要仪器和试剂

主要仪器：罗氏LightCycle 480荧光定量PCR仪、高速冷冻离心机（sigma 2-16 pk）。

主要试剂：RNA柱式提取套装，PEDV、TGEV、PCV-2、PRV荧光RT-PCR检测试剂盒，均购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司。

1.3 样品检测

研究共检测PEDV、TGEV、PCV-2、PRV4项。总RNA提取按照柱式RNA提取套装说明书操作。提取后，-40℃保存备用。按照试剂盒说明书配制反应体系，并进行扩增。

1.4 结果判断

使用LightCycle 480 software处理扩增曲线，按照试剂盒说明书进行结果判定。

2 结果

共检测2015年11月至2016年2月，采自9个县市区36家中小型养猪场的病料134份，每场采样2～5份。结果：PEDV、TGEV、PCV-2、PRV阳性率分别为73.9%、17.9、21.6%和20.1%，群阳性率分别为83.3%、27.8%、33.3%和25.0%。绝大部分发病猪场存在2～3种病毒的混合感染。

3 讨论

临床上，仔猪腹泻的发生往往是多方因素共同作用的结果。如，玉米霉变导致的黄曲霉素含量过高、气候剧烈变化引起的冷应激、细菌原性腹泻、病毒原性腹泻等。秋冬季节气温下降，造成的冷应激是发生仔猪腹泻的主要诱因。中小型养猪场保温措施差，隔离、卫生条件差，也是引发仔猪腹泻病暴发的主要原因。研究结果显示PEDV阳性率最高，说明仔猪腹泻的流行PEDV是主要致病因子，此结果与我国其他地区近年来仔猪腹泻的致病原一致［4～6］。仔猪腹泻的发生，往往伴随着多种病毒的混合感染［2～4］。研究也证明了这一点，TGEV、PCV-2、PRV病毒与PEDV的混合感染是导致疫病发病快、死亡率高的原因之一。

对养殖场户调查问询可知，仔猪腹泻病的死亡率普遍在70%以上，部分死亡率在90%以上。多家猪场免疫PEDV-TGEV二联苗，并未起到保护作用，究其原因，可能是由于母源抗体水平过低或PEDV病毒突变造成的，尚需进一步研究确定。

［1］ 林裕胜，王隆柏，吴秋玉，等.福建省猪流行性腹泻流行病学调查.中国农学通报，2014，30（35）：83～86

［2］ 韩庆安，张志，李同山，等.2010-2013年河北省猪场腹泻病流行病学调查.流行病学，2015，32（5）：5～8

［3］ 毛黎红，王开功，周碧君.贵州省部分地区规模化猪场仔猪4种腹泻病毒感染调查.动物医学进展，2015，36（5）：121～124

［4］ 杜季梅.仔猪病毒性腹泻流行病学调查及卵黄抗体在PEDV防治中的应用.河南农业大学，2013

［5］ 赵梦姣.2012年春季山东省猪流行性腹泻的流行病学调查.山东农业大学，2013

［6］ 林裕胜，王隆柏，吴学敏，等.2012-2013年福建省猪流行性腹泻流行病学调查.福建畜牧兽医，2015，35（6）：16～18