薛宝君， 辛 良， 樊富慧，3， 张 飞， 陈 健， 范庆增，

温会文1， 王文琮1， 陈 默1， 王宏钧1， 常建宇1

(1.中国农业大学动物医学院 ， 北京海淀100193 ； 2.天津市中升挑战生物科技有限公司 ，天津西青300380 ； 3.上海康臣生物科技有限公司 ， 上海奉贤201411 ；4.天津市开发区宏景工贸有限公司 ， 天津塘沽300457)

新型氯基消毒剂烟熏消毒的效果验证

薛宝君1，2， 辛 良1， 樊富慧1，3， 张 飞4， 陈 健1， 范庆增1，2，

温会文1， 王文琮1， 陈 默1， 王宏钧1， 常建宇1

(1.中国农业大学动物医学院 ， 北京海淀100193 ； 2.天津市中升挑战生物科技有限公司 ，天津西青300380 ； 3.上海康臣生物科技有限公司 ， 上海奉贤201411 ；4.天津市开发区宏景工贸有限公司 ， 天津塘沽300457)

为了验证以二氯异氰尿酸钠为主要成分的粉状消毒剂的杀菌效果。采用种蛋检测方法进行试验观察。结果低湿度时，二氯异氰尿酸钠按照0.4、0.6、0.8、1 g/m33 熏蒸消毒30、60、120 min，对种蛋表面细菌杀灭率为73.49、77.23、77.72、74.90、77.23、91.72、70.55、89.20、68.54%和84.36、80.12、89.16%。高湿度时，二氯异氰尿酸钠按照0.4、0.6、0.8、1 g/m3熏蒸消毒30，60，120 min，对种蛋表面细菌杀灭率为81.33、91.25、84.65、84.74、91.15、69.53、91.25、93.87、78.48、91.27、94.17%和72.18%。表明湿度高对消毒剂杀菌效果有积极影响，该消毒剂杀菌效果好且使用方便。

二氯异氰尿酸钠 ； 湿度 ； 福尔马林 ； 消毒

种蛋入孵前的清洁消毒可以提高种蛋利用率，减少种蛋孵化过程中细菌感染。烟熏消毒是最为简洁、全面、彻底的消毒手段，目前以甲醛和高锰酸钾为原料的烟熏消毒剂应用最为广泛，但综合考虑其消毒的不利影响，成本压力及可操作性，尤其是对操作人员的毒副作用等因素，人们迫切需要一种操作方便、无污染、无残留、无毒副作用的新型烟熏消毒产品替代甲醛和高锰酸钾对种蛋及室内环境进行消毒，并达到日常安全生产的目的。以二氯异氰尿酸钠为原料制成的烟熏消毒剂应用较为广泛，为评价该产品的在此方面的作用效果，本次试验效果验证旨在为用户提供更为详实的数据支持，以期为生产实践提供更经济有效的参考。

1 材料与方法

1.1 主要材料和试剂 高锰酸钾和福尔马林常规剂量(14 g：28 mL/m3)；新型烟熏剂(主要成分：二氯异氰尿酸钠)，由日本明治制药株式会社提供，商品名：克蹄顿；燃烧伴侣克特，由日本明治制药株式会社提供；种蛋来源：大发正大。营养琼脂培养基：将蛋白胨10 g、牛肉粉3 g、氯化钠5 g、琼脂15 g、蒸馏水1 000 mL，混合调pH 值7.2～7.4，加热溶解，装于锥型瓶灭菌备用；熏蒸空间：无菌超净工作台，体积为0.34 m3。

1.2 试验设计 二氯异氰尿酸钠的熏蒸湿度设计为：28%～32%，65%～70%；时间设计为30、60、120 min 3 个梯度；剂量设计为0.4、0.6、0.8、1.0 g/m34 个梯度，完全交叉进行，共计24 个试验组，每组种蛋10 枚。高锰酸钾和福尔马林的熏蒸湿度设计为28%～32%，65%～70%；熏蒸时间为30 min，剂量设计为常规剂量。熏蒸间的天花板用胶布密封，下端透气间隙也用胶布密封。用配好的营养琼脂培养皿放于37 ℃恒温培养箱监测该培养箱的细菌数。

1.3 种蛋检测方法(棉签拭抹法) 将每组鸡蛋(10个)编号1-10号。尖端朝下放好，每个鸡蛋用直径为2.6 cm的圆圈在大头端画出左右对称的两个区域，熏前在每个鸡蛋左侧画定区域棉签醮生理盐水涂抹，将棉签折断浸入500 μL 生理盐水中，室温放置30 min之后用旋转摇荡仪振荡15 s，移液器吸取50 μL 于普通营养琼脂平板上，涂布器涂布均匀，旋转一段时间，待琼脂将水分吸收后，置于37 ℃恒温培养箱中培养24 h，取出计数。熏后在右侧圆圈区域内重复如前操作。每批检测不同熏蒸位置的种蛋10枚，计算平均带菌数。3 d后进行下一批熏蒸消毒试验。

2 结果

2.1 湿度为28%～32%时，新型氯基消毒剂二氯异氰尿酸钠熏蒸的结果 从表1 可见，在湿度为28%～32%时，二氯异氰尿酸钠按照0.4、0.6、0.8、1 g/m3熏蒸消毒30、60、120 min，对种蛋表面细菌杀灭率为73.49、77.23、77.72、74.90、77.23、91.72、70.55、89.20、68.54%和84.36、80.12、89.16%。

2.2 湿度为65%～70%，新型氯基消毒剂二氯异氰尿酸钠熏蒸的结果 从表2 可见，在湿度为65%～70%时，二氯异氰尿酸钠按照0.4、0.6、0.8、1 g/m3熏蒸消毒30、60、120 min，对种蛋表面细菌杀灭率为81.33、91.25、84.65、84.74、91.15、69.53，91.25、93.87、78.48%和91.27、94.17、72.18%。

表1 湿度为28%～32%，新型氯基消毒剂二氯异氰尿酸钠不同浓度和不同时间的熏蒸效果

表2 湿度为65%～70%，新型氯基消毒剂二氯异氰尿酸钠不同浓度和不同时间的熏蒸效果

2.3 湿度不同，新型氯基消毒剂二氯异氰尿酸钠熏蒸结果的比对 从表3 可见，在相同熏蒸剂量和时间的情况下，湿度高对于提高杀菌率有积极的影响。

表3 新型氯基消毒剂二氯异氰尿酸钠不同湿度熏蒸结果

2.4 高锰酸钾和福尔马林熏蒸的效果 从表4可见，常规剂量甲醛熏蒸效果和湿度有很大关系。湿度在65%～75%的杀菌效果明显好于湿度32%的情况。两次高湿度和一次低湿度的平均杀菌率为91.20%。

表4 高锰酸钾和福尔马林不同湿度消毒后的细菌检测结果

2.5 对种蛋的影响 根据上述杀菌试验的效果，分别选取二氯异氰尿酸钠4个浓度梯度抑菌效果接近或超过40%甲醛的最短时间为种蛋孵化前熏蒸，即0.4 g/m3，0.6 g/m3高湿度熏蒸60 min 和0.8 g/m3，1.0 g/m3高湿度熏蒸30 min。甲醛和高锰酸钾常规剂量熏蒸(14 g：28 mL/m3，30 min)一组，空白对照一组。每组熏蒸种蛋100 枚进行孵化，记录出壳率，健雏率和7 日龄以内存活率(表6)和健康状况。

从表5 中可见，新型氯烟熏剂和甲醛熏蒸后孵化，孵化率相近，但略低于空白对照组。且用两种消毒剂熏蒸后，健雏率也较为接近，但都低于空白对照组。可见熏蒸消毒后对健雏率影响更大。只有0.8 g/m3组和空白对照组相近，比其他组较高，但不排除偶然因素。从表6 中可见，7 日龄以内，新型氯烟熏剂和甲醛组存活率相差不大，但是都低于空白对照组。只有0.8 g/m3组和空白对照组相近，但不排除偶然因素。

表5 新型氯烟熏剂和甲醛熏蒸后的孵化率与健雏率

表6 新型氯烟熏剂和甲醛熏蒸后7日龄以内存活率/ %

3 讨论与分析

二氯异氰尿酸钠在高温下，产生二氧化氯和新生态氧，利用二氧化氯的强氧化能力，将菌体蛋白质氧化，从而达到杀死细菌、病毒、芽孢等病原微生物的作用[1]。新型氯基消毒剂克蹄顿烟熏的试验结果表明，消毒时间、消毒浓度和湿度明显影响消毒效果，在相同熏蒸剂量和时间的情况下，湿度高对于提高杀菌率有积极的影响，但是熏蒸120 min 时湿度低杀菌效果更好，具体原因还有待于进一步的探讨和分析。在相同熏蒸剂量和湿度的情况下，灭菌效果与熏蒸时间有正相关性；在相同时间和高湿度的情况下，灭菌效果与熏蒸浓度有正相关，在低湿度没有显示这一性质，这可能与细菌种类及种蛋的带菌数量有关，从试验数据显示，很显然，种蛋带菌并不均匀，可能是种蛋表面不干净，导致粘附在蛋壳上的粪内的病菌不能杀灭，故而出现上述情况[2]。

从熏蒸后种蛋表面细菌数来看，福尔马林熏蒸消毒效果非常明显，但由于甲醛具有较大的刺激性，福尔马林熏蒸消毒种蛋时时间不宜过长，否则福尔马林蒸汽分子将能透过蛋壳和壳膜，对胚胎造成不同程度的毒害[3]，时间越长，胚胎死亡越多，影响越大，造成头照时呈现出大量无精蛋和死精蛋及后期胚蛋，从而降低入孵蛋的孵化率，造成严重的经济损失[4]。

新型氯烟熏剂和甲醛熏蒸后孵化，孵化率相近，但略低于空白对照组。且用两种消毒剂熏蒸后，健雏率也较为接近，但都低于空白对照组。可见熏蒸消毒后对健雏率影响更大。只有0.8 g/m3组和空白对照组相近，比其他组较高，但不排除偶然因素。相比之下，新型氯烟熏剂穿透能力不如福尔马林，所以对种蛋的影响不大。

通过各组试验结果的分析比较，在其他条件因素基本相同的情况下，利用福尔马林熏蒸较新型氯烟熏剂消毒效果好，但0.8 g/m3和1 g/m3高湿度熏蒸60 min 的杀菌效果比甲醛组略好，为试验数据最优组。

[1] 高迎春.二氯异氰尿酸钠在养殖业中的开发应用[J].山东农业科学，1998，2：49.

[2] 梁棋，辜新贵.新型氯烟熏剂与福尔马林对种蛋的消毒效果比对试验[J].广东畜牧兽医科技，2011，36(1)：35-38.

[3] 徐秉波，孟宪武，桑莲花，等.福尔马林两次熏蒸消毒种蛋对出雏率影响的报告[J].畜牧生产，2007(1)：7.

[4] 金光明，项文艺，章天霞.甲醛熏蒸消毒时间对种蛋孵化率的影响[J].安徽技术师范学院学报，2002，16(3)：45-46.

Verification of fumigated effect of The new chlorine-based disinfectants

XUE Bao-jun1，2， XIN Liang1， FAN Fu-hui1，3， ZHANG Fei4， CHEN Jian1，FAN Qing-zeng1，2， WEN Hui-wen1， WANG Wen-cong1， CHEN Mo1， WANG Hong-jun1， CHANG Jian-yu1

(1.Colloge of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing 100193, China; 2.Tianjin Zhongsheng Challenge Biotechnology Co., Ltd., Tianjin 300380, China; 3.Shanghai Kangchen Biotechnology Co., Ltd., Shanghai 201411, China; 4.Tianjin Development Zone Hongjing Industrial and Trade Co., Ltd., Tianjin 300457, China.)

To verify the bactericidal effects of a powdered disinfectant with the main ngredient of uric acid sodium dichloroisocyanurate. Detect its bactericidal effects on eggs. At low humidity sodium dichloroisocyanurate at the concentration of 0.4 g/m3, 0.6 g/m3, 0.8 g/m3, or 1 g/m3was used to fumigate the eggs for fumigation for 30 min, 60 min, or 120 min, and the killing bacteria on the surface of eggs was 73.49%, 77.23%, and 77.72%, 74.90%, 77.23%, and 91.72%, 70.55%, 89.20%, and 68.54%, and 84.36%, 80.12%, and 89.16%, respectively. At high humidity, sodium dichloroisocyanurate at the concentration of 0.4 g/m3, 0.6 g/m3, 0.8 g/m3, and 1 g/m3, was used to fumigate 30 min, 60 min, and 120 min. The killing bacteria on the surface of eggs was 81.33%, 91.25%, and 84.65%,84.74%, 91.15%, and 69.53%, 91.25%, 93.87%, and 78.48%, and 91.27%, 94.17%, and 72.18%, respectively. High humidity has a positive impact on the bactericidal effect of disinfectants, and this disinfectant has a good effect on bactericidal.

Sodium dichloroisocyanurate; humidity; Formalin; disinfection

s:CHANG Jian-yu ; WANG Hong-jun

2014-09-01

贵州省科技计划项目[黔科合NV字(2012)3028号]

薛宝君(1975-)，男，硕士，从事禽病诊疗及兽药研发工作，E-mail：1005098643@qq.com

辛良(1990-)，男，硕士生，主要从事中兽医及兽医外科学的研究，E-mail：parleyxin@163.com

注：辛良与薛宝君对本文具有同等贡献

常建宇，E-mail：changjianyu@cau.edu.cn；王宏钧，E-mail：31674077@qq.com

R187

A

0529-6005(2016)12-0000-00