杨军霞 ， 雷程红 ， 王振宝 ， 葛 婷 ， 卞赛赛 ， 王旭蕾 ， 徐 剑

(1．新疆农业大学科学技术学院， 新疆乌鲁木齐830052；2．新疆农业大学动物医学学院， 新疆乌鲁木齐830052； 3．伊犁出入境检验检疫局， 新疆伊宁835000)

应用LAMP技术鉴别猪牛羊肉

杨军霞1， 雷程红2， 王振宝3， 葛 婷2， 卞赛赛2， 王旭蕾1， 徐 剑1

(1．新疆农业大学科学技术学院， 新疆乌鲁木齐830052；2．新疆农业大学动物医学学院， 新疆乌鲁木齐830052； 3．伊犁出入境检验检疫局， 新疆伊宁835000)

肉类是否掺假是消费者在购买肉制品时比较注意的问题，用猪肉、鸡肉、鸭肉等价格便宜的肉掺入牛羊肉及其肉制品中，是牛羊肉制品最常见的掺假方式[1]。近年来，肉类掺假问题已引起社会广泛关注[2]。为了解牛羊肉制品中掺加猪肉情况，我们对霍尔果斯市几家超市的牛羊肉及其肉制品进行了检测。

1 材料与方法

1.1 样品 新鲜的牛肉、羊肉、猪肉、马肉，火锅用的羊肉卷，清真牛肉火腿肠，撒尿牛丸，牛肉丸子，鸡肉火腿肠(成分中标明有猪肉)。

1.2 引物 猪线粒体COXI基因LAMP引物参照杨丽霞等方法[3]，由北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司合成。

1.3 主要试剂 组织基因组提取试剂盒(天根生化科技(北京)有限公司)，BstDNA聚合酶(NEB)，SYBR Green-I核酸染料(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司)，PremixTaq酶、dNTPs、DL-2000 DNA Marker(宝生物工程(大连)有限公司)。

1.4 主要仪器设备 LAMP实时浊度仪LA-320，电泳仪，紫外光度计，凝胶成像仪，恒温温匀器，冰箱，离心机，微量移液器。

1.5 样品组织基因组的提取 按照组织基因组提取试剂盒的操作说明书进行。

1.6 猪线粒体COXI基因LAMP扩增 LAMP反应体系为25 μl：2*反应缓冲液12.5 μL，引物混合物1.0 μL，BstDNA聚合酶1.0 μL，模板2.0 μL，双蒸水8.5 μL。……