孙玉章，倪雪霞，李金明，吴发兴，王永玲（中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）



动物RNA病毒反向遗传学操作技术及应用进展

孙玉章，倪雪霞，李金明，吴发兴，王永玲
（中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）

摘 要：本文简述了反向遗传操作技术的基本原理以及近年来动物RNA病毒基因复制与表达调控机理、病毒与宿主间的相互作用，以及构建新型病毒载体和研发新型疫苗等方面的研究进展。

关键词：动物RNA病毒；反向遗传学；病毒拯救；新型疫苗；应用进展

多数动物RNA病毒引起难以控制、危害严重的疫病，是病毒学领域重要的研究对象之一。但RNA病毒（除逆转录RNA病毒外）的复制周期并不经历DNA中间阶段，重组DNA技术不能直接运用于动物RNA病毒基因组的修饰与分析，而且RNA分子在体外较DNA分子更难以操作。近几十年发展起来的反向遗传学技术使这一问题得到了近乎完美地解决，极大地促进了对动物RNA病毒分子生物学的研究，并衍生出了“反向疫苗学”等新兴学科。

反向遗传学技术是以生物基因为主要研究对象，基于对基因核苷酸序列的人为操作，探索基因调控的分子机制以及生命发生发展的本质现象和规律等。广义的反向遗传学技术是指与反向遗传学操作相关的各种技术的统称，包括定点突变、RNA干扰、基因沉默和基因体外转录等，是重组DNA技术应用范围的扩展与延伸。狭义的反向遗传学技术仅指基因体外转录技术中的感染性cDNA克隆技术，即早期文献中通称的“病毒拯救”技术。……