川崎病患儿血浆ET、NO水平变化的临床意义

王清华,窦常胜,顾勇,金玉凤,刘丽

(皖南医学院附属弋矶山医院儿科，安徽芜湖241001)

【摘要】目的：通过观察不同组别川崎病(KD)患儿血浆内皮素(ET)、一氧化氮(NO)的水平变化，探讨其临床价值以及与冠状动脉损伤(CALs)的关系。方法：对住院KD患儿常规行心脏超声检查，根据结果分为CALs组(30例)和无CALs组(50例)，另选取90例年龄、性别无明显统计差异的同期门诊体检健康儿童作为正常对照组，同时选取同期住院的肺炎患儿40例作为病例对照组。分别采用放射性免疫方法、硝酸还原酶法测得各组血浆ET、NO水平。结果：KD患儿急性期血浆ET、NO均高于正常对照组和病例对照组，差异有统计学意义,治疗后则较正常组无明显统计学差异；CALs组血浆ET、NO均高于NCALs组，P<0.001。结论：KD患儿ET、NO的水平明显增加，且ET、NO的水平可能与冠脉损伤有关。

【关键词】川崎病；血液内皮素；一氧化氮；冠状动脉损伤

【文献标识码】【中图号】R 725.4A

DOI【】10.3969/j.issn.1002-0217.2015.01.009

文章编号：1002-0217(2015)01-0036-03

基金项目：皖南医学院重点培育

收稿日期：2014-07-06

作者简介：戴艳(1973-)，女，副主任医师,硕士，(电话)15805530803，(电子信箱)usd591@163．com；

通讯作者黄东平，男，副主任医师，(电子信箱)hdp-9713@163．com，.

Significance of the plasma ET and NO level change in children with Kawasaki diseaseWANGQinghua,DOUChangsheng,GUYong,JINYufeng,LIUli

Department of Pediatrics,Yijishan Hospital,Wannan Medical College,Wuhu 241001,China

Abstract【】Objective：To investigate the level changes of plasmic endothelin(ET) and nitric oxide(NO) in children with Kawasaki disease (KD) for determination of the clinical values of the changes and coronary artery lesions (CALs).Methods:By the routine echocardiographic findings,the hospitalized KD children were allocated to group with CALs(n=30) and without CALs (n=50).Ninety healthy subjects(without significant difference in ages and genders) undergone physical examination on out-patient basis were included as healthy controls and another 40 inpatient children with pneumonia undergone treatment on hospital stay basis were recruited as case controls.Radioimmunoassay and nitrate reductase methods were used to measure the plasma ET and NO levels in each group described above.Results: Higher plasma levels of ET and NO were seen in KD children in their acute stage than the healthy controls and case controls,and the difference was significant,whereas the difference was not after treatment as compared with the healthy controls.Plasma ET and NO levels were higher in children with CALs than those without CALs(P<0.001).Conclusion:Plasma levels of ET and NO tend to significantly elevate in KD children,suggesting that changes of ET and NO levels may be associated with coronary artery lesion.

【Key words】 kawasaki disease;plasma endothelin;nitric oxide;coronary artery lesion

川崎病是一种原因未明的以变态免疫反应为主要病理改变的疾病，这种改变是心血管系统损伤的重要基础[1],其并发症冠状动脉性心脏病的发病率已成为小儿主要的后天性心脏病[2]。川崎病的病理损害主要是对心血管尤其是冠状动脉损害，造成冠状动脉的血管壁炎性反应、扩张、狭窄以及动脉瘤的形成。本文通过检测川崎病患儿血浆内皮素、一氧化氮等浓度的变化，探讨川崎病患儿血浆ET、NO水平的临床价值以及与冠状动脉损伤的关系。现报道如下。

1对象及方法

1.1对象及分组收集2012年9月～2014年2月皖南医学院附属弋矶山医院收治的80例川崎病患儿作为实验组，其中有冠脉损伤(Coronary artery injury，CAL)30例，无冠脉损伤(NCAL)50例，男39例、女41例，年龄1～6岁；另选取同期本院健康体检儿童90例作为正常对照组，女34例、男56例，年龄1～8岁。两组性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)。另选取同期住院并出现发热症状的1周

以内的支气管肺炎患儿40例作为病例对照组，其中男16例，女24例，年龄(4.6±1.6)岁，见表1。

表1不同组别一般资料(均数)

组别男女体质量(kg)年龄(岁)正常组563415±4.3443.763±1.518病例对照组162417±3.9724.573±1.569KD组394115±4.1713.549±1.543

注：各组年龄差异无统计学意义，P>0.05

川崎病患儿住院期间均采用IVIG 2 g/次治疗。入院后均进行心脏彩色多谱勒超声检查，根据冠状动脉有无病变，将其分为有冠状动脉病变组与无冠状动脉病变组。冠状动脉损伤依据超声改变：①冠状动脉炎，即二维B超上可见冠状动脉壁辉度增加、扩张；②冠状动脉瘤；③冠状动脉血栓性闭塞；④冠状动脉狭窄。

1.2方法KD组治疗前、病例对照组(入院24 h内)及正常对照组分别在清晨空腹状态下抽静脉血4 mL，置于含有1/10体积0.109 mol/L枸橼酸钠抗凝液的试管中，立刻在4 ℃下离心(3 000 r/min，离心半径15 cm)10 min，分离血浆，置-20 ℃冷冻待测，另KD组均在经丙种球蛋白静脉治疗5～7 d后次日清晨同等条件下采血。血浆ET-1含量测定采用放射性免疫方法，试剂盒由北方生物技术研究所提供,血浆NO水平采用硝酸还原酶法测定，试剂盒购自南京建成公司，严格按照说明书操作。

2结果

2.13组治疗前血清ET、NO水平KD组治疗前血清ET、NO水平均明显高于正常对照组，差异有统计学意义(P<0.001)。同时也高于病例对照组(P<0.01)，治疗后血清ET、NO水平较治疗前显著下降，差异有统计学意义(P<0.05)，与正常对照组比较差异无统计学意义 (P>0.05)，见表2。

2.2冠脉损伤组与非损伤组治疗前后ET、NO水平疗前患儿伴冠状动脉损伤(CALs)组与无冠状动脉损伤(NcALs)组比较，CALs组血浆ET、NO水平明显增高，差异有统计学意义(P<0.001)，见表3。

组别nET(ng/L)NO(μmol/L)正常对照组9087.45±0.7843.51±0.98KD组治疗前80194.08±41.96162.80±29.62病例对照组4088.72±4.3643.52±2.86F413.5411043.647P<0.01<0.01

指标组别治疗前治疗后d±Sd配对t值P值ET(ng/L)CALs组247.75±4.055117.44±5.553130.31±5.23136.462<0.001NCALs组161.88±2.644118.63±5.83143.25±6.81244.896<0.001NO(μmol/L)CALs组200.19±5.28475.09±4.172125.10±7.73388.608<0.001NCALs组140.36±5.31279.09±5.65761.27±5.99872.226<0.001

3讨论

川崎病，又称黏膜皮肤淋巴结综合征(kawasaki disease，KD)，1967年由日本儿科医生Tomisaku Kawasaki初次描述，常累及5岁及以下儿童。目前病因未明，多数学者认为由感染因素引起[3]，国外[4]学者检测60例川崎病患儿大便标本中链球菌外毒素，结果发现检出率为70%，高于62例对照组儿童的检出率，初步证实了其发病与感染因素有关。另有研究表明KD患儿有明显的免疫紊乱发生，川崎病发病可能与细胞因子的变化及异常免疫反应密切相关[5]。

川崎病的心脏损害主要包括心肌炎、心内膜炎及冠状动脉损害，其中冠脉损害危害最大，是影响预后的主要因素[6]，在川崎病的发生发展中，其血浆中的一些炎症因子(如内皮素、一氧化氮、白细胞介素)表达增加，关于细胞因子在自身免疫性疾病发病中的作用，近年颇引人注意[7]，而这些因子在冠脉损伤炎症中又扮演着重要的角色。

KD患儿急性期血清中IL-8的水平[8]及血管内皮生长因子(VEGF)水平[9]有明显升高，且与冠状动脉的炎症程度相关。由于KD无特异性临床症状，给早期诊治带来较大的困难[10]，增加了并发症的发生。进一步的研究发现，内皮细胞功能失调是KD血管损伤的重要特征[11]，内皮细胞合成与释放的舒血管活性物质有一氧化氮等；缩血管活性物质有内皮素-1(ET-1)、血栓素A2(TXA2)和超氧阴离子等[12]。这两类血管活性物质构成一对既相互对立又相互联系的矛盾体，共同维持血管及血液内环境的平衡。内皮素(ET)是目前已知作用最强、效应最持久的内源性血管活性肽。内皮素分ET-1、ET-2、ET-3等3类，均经由内皮素受体(ETR)介导而发挥作用。现已发现的ET受体有ETA、ETB、ETC和ETAX等4类，在哺乳类动物体内只发现ETA和ETB两类受体并经过克隆得到。冠状动脉对ET高度敏感，唯ETAR参与了人冠状动脉的收缩作用[13]；ET-1是唯一由内皮细胞合成，其生成受ET-1基因(EDNl)的调控，可诱导血小板聚集，是反映血管内皮功能的有效指标[14]。ET-l水平的检测为本病的病理改变提供了新的理论依据。

一氧化氮(NO)是20世纪80年代后期发现的一种新型生物信息分子，也是内皮衍生舒张因子(EDRF)的主要构成成分，主要作用是舒张血管，是内皮细胞功能的标志分子之一，许多研究表明，川崎病急性期存在NO的过度表达[15]。NO在心血管系统有非常重要的调节作用，其功能的失调在许多心血管疾病中起重要作用。有实验发现，KD的血管损害与血管内皮细胞诱导型一氧化合酶(iNOS)表达增强，持续释放大量NO密切相关[16]，其同时也是一种细胞毒性分子，其与超氧根离子(O2-)的反应产物过氧亚硝基是一种作用更广泛的化学物质，可以导致细胞的损伤，研究表明，因iNOS的表达升高引起的NO生成过量可能参与损伤动脉壁及动脉壁的重构，使动脉出现病理性扩张，促进动脉瘤的产生[17-18]，所以它的作用是矛盾存在，具体的作用可能与其浓度、产生部位、作用的持续时间等因素有关[19]。

本研究结果发现，治疗前KD患儿的ET-1及NO水平明显高于治疗后及对照组，且CALs组显著高于NCALs组(P<0.01)，提示：ET-1、NO参与了KD的发生发展且可能与冠脉损伤有关。总之，既然ET-1、NO参与了KD的发生发展与冠脉损伤有关，是否把血浆ET-1、NO水平作为川崎病早期诊断潜在的实验室指标、预测冠脉损伤的指标？以及应用ET-1及NO抑制剂能否减轻、减少心血管事件的发生，有待进一步研究。

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