崔新厂

（山东省东营市第二人民医院 山东东营 257335）

本研究为了分析结肠癌组织与存活素、血管内皮生长因子－C（VEGF－C）的表达的关系，特对我院收治的40例患者进行分析，现将分析结果报告如下：

1 一般材料与方法

1．1 一般材料：选取我院2013年2月至2014年12月在我院实行外科切除手术结肠癌标本40例，其中男29例，女11例，年龄27～75岁，中位年龄55．1岁，同时取癌旁组织边缘5c m之外的非癌组织标本17例为对照组。所选患者均未在手术前进行抗肿瘤治疗，均无大肠癌史和家族性腺瘤病，依据PTNM标准进行TNM分期。免抗人存活素多克隆抗体工作的浓度是1：50，其VEGF－C多克隆抗体的工作浓度是1：80，所用SP试剂盒采购于福州买新生物技术开发有限公司。

1．2 方法：运用SP法进行免疫组化染色，切片脱蜡后水化，在室温下运用高压修复模式对3%H2O2孵育5分钟，并滴加VEGF－C一抗和存活素，二者均要放置在冰箱内，且在4℃环境下过夜；同时滴加链霉亲和素（以辣根过氧化酶为标记）和生物素化二抗，显色DAB。阴性对照则选用PBS为一抗替代物。1．3 评判标准及方法：存活素及血管内皮生长因子染色为呈阳性时，表示肿瘤细胞中胞质内有棕黄色颗粒；对每张切片随机选取5个高倍视野（x400），运用生物显微图像Smartscape2002系统进来对存活素和血管内皮生长因子中的蛋白表达进行处理分析，表示方法采用平均灰度值，当血管内皮生长因子和存活素的透光度强且染色强度弱时，表示其平均灰度值大，此时的蛋白表达就少，相反，则蛋白表达多［1］。

胞浆颜色呈中黄色表示细胞为阳性，选出高倍视野中5个阳性细胞并计算出其所占的比例：30%＞阳性细胞≥5%，为＋；5%＞阳性细胞，为－；60%＞阳性细胞≥30%，为＋＋；60%≤阳性细胞，为＋＋＋；为简化处理数据，将其中＋、＋＋、＋＋＋均并作阳性［2］。

1．4 统计学方法：所有数据均使用SPSS16．0进行统计学处理，结肠癌组织同癌旁组织中存活素和血管内皮生长因子的表示情况及其同结肠癌病理因素的关系使用t检验，标准差用表示，存活素及血管内皮生长因子的相关性使用pearson进行分析处理，比较差异呈现显著性表示具有统计学意义（P＜0．05）。

2 结果

2．1 结肠癌及癌旁组织中存活素的表达状况

2．1．1 结肠癌中存活素和VEGF－C表达：癌细胞组织中存活素和VEGF－C中，呈阳性表达率是59．8%和65．71%，癌旁组织中VEGF－C和存活素只在极少的上皮细胞中表达，呈阳性率是13．29%和13．29%，癌细胞组织中存活素和VEGF－C阳性表达率明显高于癌旁组织（P＜0．05）。

2．1．2 结肠癌中，存活素和VEGF－C中蛋白表达的关系：存活素中蛋白阳性表达中VEGF－C阳性表达率为85．72%，存活素中阴性表达中VEGF－C阳性表达率为35．69%，存活素中阳性表达中VEGF－C阳性表达率明显高于存活素阴性表达组，差异具有统计学意义（P＜0．05）。观察Spear man等级分析可知二者呈现出正相关系（P＜0．01）。

2．1．3 存活素和VEGF－C中蛋白表达同临床病理因素的关系：存活素中蛋白表达同VEGF－C表达相一致，同淋巴结转移、TNM分期和侵润深度的相关性很强。VEGF－C和存活素蛋白表达率，侵润深度方面明显高于（P＜0．05）；淋巴结转移组阳性率为82．8%和75．9%，淋巴结非无转移组的阳性率均为18．2%，比较差异具有统计学意义（P＜0．05）；spear man等级分析：存活素和VEGF－C同淋巴结转移呈现出正相关系（P＜0．01）；TNM分期方面，Ⅲ＋Ⅳ的阳性表达率分别是80%和88%明显高于Ⅰ＋Ⅱ期的26．7%和33．3%，比较差异具有统计学意义（P＜0．01）。此外，存活素和VEGF－C同患者的年龄、性别和组织分化程度等方面均无明显关系（P＞0．05）。具体数据如表1。

表1 结肠癌中存活素和VEGF－C表达同临床病理因素关系状况

3 讨论

存活素属于近几年来发现的凋亡抑制蛋白细胞中的一种，在成熟分化组织中存活素的表达通常很低或者无表达，在许多恶性肿瘤组织中则呈现出高表达，其同恶性肿瘤的发生及发展状况极为密切相关。存活素同肿瘤细胞的生长失控、肿瘤的发生转移、发展和预后的关系也异常密切。VEGF－C在淋巴内皮细胞中的表达能够刺激生成肿瘤淋巴管，其在肿瘤淋巴管的生成和转移中发挥着重要作用。VEGF－C对肿瘤细胞生长起着促进作用，其表达能够促使肿瘤细胞快速增殖，对肿瘤组织血管发生却无任何影响；其促进肿瘤细胞生长与肿瘤细胞中淋巴管内生长相关。研究证实［3］，在淋巴结转移方面，存活素同VEGF－C的表达明显高于淋巴结无转移中的表达；存活素和VEGF－C呈现的高表达同淋巴结转移为正相关系；同TNM分期和浸润度的关系较为密切，因为患者的生存率同TNM分期关系密切，加上唯一影响预后的因素是淋巴结转移。研究中存活素同血管内皮生成因子－C表达呈现出正相关系，P＜0．01，表明淋巴结转移和扩散中，存活素和VEGF－C起着共同促进的作用。

综上所述，对存活素和血管内皮生成因子－C表达进行临床联合检测能够对结肠癌癌变程度、治疗及预后等提供理论上的重要依据。

［1］ 苏永强；邓述恺．血管内皮生长因子及受体在肿瘤发病机制中的研究进展 ［J］现代医药卫生．2014，（02）：235－237．

［2］ 陈玲．结肠癌组织中Bmi－1表达变化及意义．［J］现代诊断与治疗．2014，（160）：3810－3812．

［3］ 陈伟斌．结肠癌血管内皮生长因子－C及血管内皮细胞生长因子受体－3的表达与淋巴结转移的关系 ［J］．实用临床医学，2014，（04）：32－34＋139．