李玉婵，刘国良

廊坊市疾控中心，河北廊坊065000

廊坊市2013—2014年手足口病病毒核酸检测结果分析

李玉婵，刘国良

廊坊市疾控中心，河北廊坊065000

目的分析廊坊市2013—2014年手足口病病毒核酸型别及分布特征，为预防和控制手足口病提供科学依据。方法对该市各级医疗机构送检的手足口病临床诊断病例标本，采用Real-time RT-PCR法进行病毒核酸检测并分型。结果2013年4月—2014年12月共收到咽拭子标本462份，检出阳性标本318份，总阳性率68.83%，其中EV71型95份，占29.87%；CoxA16型108份，占33.96%。发病年龄主要集中在5岁以下儿童，占85.50%。结论2013年廊坊市手足口病的病原体以EV71型为主，2014年廊坊市手足口病的病原体以CoxA16型为主，5岁以下儿童是肠道病毒感染的高危人群。

手足口病;核酸；肠道病毒EV71型;肠道病毒CoxA16型

手足口病（hand-foot-mouth disease,HFMD）是由肠道病毒引起的、一种儿童常见急性传染病，多发生于5岁以下儿童，该病出现发热和手、足和口腔等部位的发疹、溃疡[1]，具有播散快、流行性强的特点。引起手足口病的肠道病毒有20多种（型），其中以肠道病毒71型（EV 71）和柯萨奇病毒A16型（Cox A16）最为常见。近几年全世界已有多个国家和地区报告了手足口病的流行[2-3]，引起手足口病的肠道病毒有20多种（型），其中以EV71型和CoxA16型感染最常见。该研究对2013—2014年廊坊市手足口病临床诊断病例进行核酸检测分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2013年4月—2014年12月廊坊市各级医疗机构临床诊断手足口病病例。

1.2 诊断标准

手足口病的诊断依据参照原卫生部《手足口病诊疗指南》（2012年版）。

1.3 标本采集

用病毒采样管采集手足口病例咽拭子标本，置-70℃保存，并于48 h内冷藏送达微生物实验室。采样管由友康基业生物科技（北京）有限公司生产。

1.4 提取病毒RNA

采用Ambion公司的MagMAXTM—96Viral RNA Isolation kit配套于ThermoFisher Scientific KingFisherFlex全自动磁珠提取系统，按照试剂盒说明书和仪器操作规程来提取病毒RNA。

1.5 PCR扩增

仪器：美国ABI7500实时荧光定量PCR扩增仪。核酸检测试剂盒（PCR荧光法）：由上海之江生物科技有限公司和江苏硕世生物科技有限公司生产，反应体系按照试剂和说明书配制。

1.6 结果判断

按照试剂说明书判断。

2 结果

2.1 核酸检测结果

2013—2014年共收到手足口病标本462份，阳性318份，阳性率68.83%。其中，EV71型95份，占阳性标本的29.87%,CoxA16型108份，占阳性标本的33.96%。不同年份手足口病核酸检出率差异无统计学意义（χ2=0.42，P＞0.05），但不同年份手足口病流行核酸型别不同（χ2=020.37，P＜0.01），即2013年以EV71型流行为主，2014年以CoxA16型流行为主。（表1）。

2.2 季节分布

2013—2014年廊坊市手足口病核酸阳性数均自4月份开始上升，6月达到高峰，7月开始下降，主要集中在5～8月，符合手足口病的流行特征（图1）。

表1 2013—2014年廊坊市手足口病核酸检测结果

图1 2013—2014年廊坊市手足口病时间分布

2.3 地区分布

全市10个县（市、区）每年检测均有阳性病例，2013年全市以EV71型优势流行，主要分布在三河市、香河县和安次区，2014年全市以CoxA16型优势流行，主要分布在大厂县、三河市、霸州市和香河县（图2）。

图2 2013—2014年廊坊市手足口病阳性病例地区分布图

2.4 人群特征

2013年和2014年廊坊市手足口病阳性病例中，男性112例，女性91例，性别比1.23:1。不同性别儿童EV71型和CoxA16型阳性率差异无统计学意义（χ2=5.90，P＞0.05）。发病年龄以0岁?5岁儿童为主，占85.50%。年龄最小者仅2月，最大者16岁。职业分布以散居儿童和幼托儿童为主，占总人数96.54%（表2）。

3 讨论

手足口病是由多种肠道病毒引起的全球性传染病，最早于1957年在新西兰流行[4]，世界大部分地区都有此病流行的报道。近年来，由EV 71引起的手足口病和神经系统严重并发症日益受到人们密切关注[5]，严重患者并发神经性肺水肿或脑干脑炎[6]，迅速出现死亡，因此我们应警惕上述严重并发症的发生，2008年5月2日原卫生部将HFMD纳入法定丙类传染病管理。

2013年和2014年共检测手足口病临床诊断病例462份，确诊率为68.83%，EV71型和CoxA16型分别占29.87%和33.96%，所以这两年引起廊坊市手足口病的主要病原体是EV71型和CoxA16型。

表2 2013年—2014年廊坊市手足口病的社会人口学特征

手足口病有明显的季节性，春末夏初季流行，6月能达到高峰；主要以5岁以下儿童为主，占85.50%；散居儿童病例多，占71.86%；男性多于女性，比例为1.23:1，可能与男孩好动，接触频繁，接触传染机会大有关。

2013年全市以EV71型优势流行，2014年全市以CoxA16型优势流行型，29.87%的以EV71感染为主,33.96%以CoxA16感染为主，有型别交替感染的现象。全市各县（市、区）均能检出阳性病例，但是各型肠道病毒阳性检出率有差异，可能与标本来源、标本质量有一定关心，而且标本种类单一，今后应采集所有种类标本。

EV71型肠道病毒除了引起手足口病外，部分婴儿感染后容易出现严重的神经系统并发症，如无菌性脑炎、脑膜脑炎和脑干脑炎等，少数发展为肺水肿/肺出血。虽然实验室未收到手足口病重症病例，但是我们必须对有类似症状的标本及时监测，降低重症病例的发病。

5岁以下儿童为重点防治人群，他们抵抗力差，环境卫生意识不强，我们要加强宣传教育，做好疫情监测和疫情报告工作，同时加强实验室病原学检测，更好控制疫情蔓延，为手足口病患儿争取最佳治疗时间。

[1]耿贯一.流行病学[M].2版.北京:人民卫生出版社,1996.

[2]李静，周红瀛，杜宝静，等.邯郸地区2009—2011年重型手足口病的临床特征和流行病学分析[J].医学动物防制，2012，4（28）：411-412.

[3]周红娟,严飞.张家港市2010—2013年儿童手足口病病原学监测及流行特征分析[J].医学理论与实践，2014(21)：2904-2905.

[4]蔡颖,梁润梅,刘志鹏,等.2009—2013年成都市青白江区手足口病疫情分析[J].职业卫生与病伤，2015(1)：37-40.

[5]李昆宏,董菊花,刀保清,等.2009—2013年云南省德宏州手足口病流行病学分析[J].卫生软科学，2015(2)：112-114.

Analysis on Hand-foot-mouth Disease Virus Nucleic Acid Detection Results in 2013-2014 in Langfang

LI Yu-chan，LIU Guo-liang
The Center for Disease Control and Prevention of Langfang City，Hebei Prvince，065000 China

ObjectiveTo analyse the type and distribution characteristics ofhand-foot-mouth disease virus nucleic acid in Langfang city in 2013-2014,and provide scientific basis for the prevention and control of hand foot and mouth disease.MethodsFor all levels of medical institutions in this Municipality for the clinical diagnosis ofcases of hand foot mouth disease specimens, using the Real-time RT-PCR method for virus nucleic acid detection and classification.Results318 specimens were tested positive for enterovirus from 462 specimens from 2013 April to 2014 December,the total positive rate was 68.83%,In all cases,95 samples were EV71 type(29.87%)and 108 samples were CoxA16 type 33.96%.ConclusionThe major pathogens for HFMD in Langfnag were EV71 in 2013 and CoxA16 in 2014.Children under 5 years old are the high-risk population of enterovirus infection.

Hand-foot-mouth disease(HFMD);Nucleic;EV71;CoxA16

R51

A

1672-5654（2015）03（c）-0018-02

2015-01-15）

李玉婵（1979-），女，河北廊坊文安县人，本科，廊坊市疾控中心主管检验师，主要负责微生物检验及病毒检测工作。

刘国良（1982-），河北廊坊文安县人，本科，廊坊市疾控中心检验师，主要负责微生物检验及病毒检测工作。