何朝树

（汾阳市中医医院检验科，山西032200）

不同方法检测尿液中红细胞结果分析

何朝树

（汾阳市中医医院检验科，山西032200）

目的探讨3种方法检测尿液红细胞的作用和价值。方法收集该院2014年3～4月住院及门诊400例患者的晨尿标本400份于一次性尿管中，并在2 h内进行干化学分析仪及显微镜检测、UF-1000i尿液流式细胞分析仪。结果以尿沉渣显微镜检测结果为诊断标准，尿干化学法假阳性24例（6%），假阴性8例（2%）；UF-1000i尿液流式细胞分析假阳性1例（0.3%）；假阴性14例（3.5%）。UF-1000i尿液流式细胞分析仪对尿液标本中红细胞的检测结果与干化学分析仪比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论3种方法对尿中红细胞的检测结果存在差异，流式细胞分析法和干化学法易出现假阴性和假阳性，建议3种方法联合应用，以提高尿中红细胞的阳性检出率。

红细胞；尿分析/仪器和设备；显微镜检查；流式细胞术；化学，分析；对比研究

尿液常规分析是临床上常见的实验室检查项目之一。尿液中红细胞的准确分析，可以对泌尿生殖、消化等系统的疾病提供诊断和鉴别诊断依据。目前临床上对尿液常规分析主要采取干化学分析法、流式细胞分析术及尿沉渣显微镜检查。干化学分析法标本用量少，操作简便，项目较多，检测速度快，而且重复性好，适用于大批量标本的健康体检，但其结果容易受药物、外源性物质和人为因素的干扰，可出现假阳性或假阴性。UF-1000i尿液流式细胞分析仪采用流式细胞技术，核酸染色，具有快速、误差小、精密度高的特点，而且可以对尿液中有形成分进行检测分析。尿沉渣显微镜检可以真实展现细胞等有形成分的形态，直观、可靠，是尿中红细胞检查的“金标准”，但逐一镜检，检测速度远远不能适应临床上日益增多的尿液标本的要求，况且没有统一质控物，难以实现室内质控。根据上述3种尿液分析常用方法各自的优缺点，本研究对400份尿液标本进行尿液干化学、流式细胞术及显微镜联合检测，并对其检测结果进行分析和比较。

1 资料与方法

1.1 一般资料收集本院2014年3～4月住院及门诊400例患者的晨尿标本（清晨起床后未进食早餐和做运动之前排泄的尿液标本），采集标本前应清洁生殖器，并留取中段尿于一次性无菌尿管中，接收标本时应严格核对患者姓名、性别、化验单与标本容器标号是否一致。400例患者中男297例，女103例；年龄16～79岁；内科306例，外科、妇产科各47例。所有标本均要求在2 h内完成尿液干化学、UF-1000i尿液流式细胞分析和尿沉渣显微镜检查，避免细菌繁殖、细胞溶解等诸多因素对检测结果造成影响。

1.2 仪器与试剂干化学分析使用山西亚森FA-100及其配套试纸条；尿液流式细胞分析仪为日本Sysme的UF-1000i，试剂为配套试剂；显微镜使用日本奥林巴斯双目显微镜，离心机使用长沙平凡仪器仪表公司生产的TD-5I型水平式离心机。

1.2 方法

1.2.1 检测方法

1.2.1.1 尿干化学分析仪每天开机后先用质控品进行室内质控，确定质控通过后，取试纸条浸入盛有患者尿液标本的一次性尿管中数秒，然后取出放置于仪器试带槽，然后按仪器操作步骤进行检测，同时记录结果。

1.2.1.2 UF-1000i尿液流式细胞分析仪每天开机后，先分别使用高低2种质控物对仪器进行室内质控，在确保质控通过后，按照仪器操作步骤，开始对尿液标本上机检测，并上传数据，记录保存。

1.2.1.3 尿沉渣显微镜检查取混匀尿液标本10 mL于刻度离心管中以1 500 r/min离心5 min，弃去上清液，留取沉淀物0.2 mL，滴于洁净的载玻片上镜检，先以低倍镜（100×）观察，再以高倍镜（400×）观察，分别以10个高倍视野下的红细胞取平均值，并记录结果。

1.2.2 判定标准以尿沉渣显微镜检查结果为待检尿液中红细胞个数的“金标准”：以每个高倍视野下红细胞超过3个为阳性，对UF-1000i尿液流式细胞分析仪和干化学分析法的检测结果作评价。UF-1000i尿液流式细胞分析仪的红细胞正常参考范围为每微升0～25个，干化学分析法以试纸条出现阳性反应为阳性。

1.3 统计学处理应用SPSS15.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3种方法检测尿中红细胞结果比较400例患者尿液标本中红细胞检测结果有7种情况，尿干化学法假阳性24例（6%），假阴性8例（2%）；UF-1000i尿流式细胞分析假阳性1例（0.3%）；假阴性14例（3.5%）。见表1。

表1 3种方法检测尿中红细胞结果比较

2.2 干化学分析法和UF-1000i检测结果比较干化学分析法和UF-1000i尿液流式细胞分析仪2种方法检测尿液中红细胞结果比较，差异有统计学意义（χ2=17.8，P＜0.05）。见表2。

表2 干化学分析和UF-1000i检测结果比较（n）

3 讨论

本研究中表1结果显示，出现检测情况1和7时，干化学分析和UF-1000i尿液流式细胞分析仪都为阴性结果261例，尿沉渣镜检也是阴性260例，3种方法检查都为阴性的符合率为99.6%。故可以建议当尿干化学分析仪和UF-1000i尿液流式细胞分析仪联合检测尿中红细胞都出现阴性结果时，可不用显微镜镜检进一步检查尿沉渣中的红细胞，而直接出示报告[1]。将2种方法联合应用，综合分析可提高尿液中红细胞检测的准确度，可适用于大批量的健康体检标本检测。

本研究中表1结果还显示，出现检测情况3时，有24例尿液标本UF-1000i尿液流式细胞仪和尿沉渣镜检均为阴性，而尿液干化学分析法则为阳性，假阳性率为6%。干化学分析法检测尿液中红细胞的原理是根据血红蛋白的亚铁血红素具有过氧化物酶活性，可以催化分解过氧化物，使邻联甲苯胺氧化而呈色。其颜色深浅与血红蛋白水平有关[2]。多数情况下可以反映尿液中红细胞的有无，但不能分析其形态。一般造成干化学分析法出现假阳性的因素有：（1）某些肾脏疾病；（2）低比重尿；（3）低pH值尿；（4）放置时间过长引起尿中红细胞破坏，释放出血红蛋白而出现假阳性[3]。表1出现情况4可见，8例患者尿标本红细胞检测UF-1000i流式细胞分析仪和沉渣镜检均为阳性，而干化学分析法则为假阴性，占2%。引起假阴性的结果可能是尿液中含有维生素C等还原性物质干扰所致[4]。

本研究中表1结果还显示，出现检测情况5时，有1例患者尿液标本其干化学法与尿沉渣镜检均为阴性，而UF-1000i尿流式细胞分析仪显示为阳性。UF-1000i尿液流式细胞分析仪用红色半导体激光束照射经过核酸荧光染色后的尿液标本在鞘液分析池中形成鞘液样本，并通过各粒子产生的前向散射光、侧向散射光以及侧向荧光信号转换成的光电信号进行分析和识别，并通过计算得到相应细胞的大小、长度、体积等，同时得到有形成分的直方图和散点图[5]，而尿液中出现草酸钙结晶、酵母菌时，由于其大小和红细胞接近，可以干扰红细胞计数，造成假阳性结果[6]。表1出现情况6可见，有14例尿液标本干化学分析仪和沉渣镜检红细胞均为阳性，而UF-1000i尿液流式细胞分析仪则显示为阴性，占到总数的3.5%，UF-1000i尿液流式细胞分析仪只能检出其中的有形成分，当检测前患者服用过能产生荧光染料类似作用的药物时，或者标本留取时间过长，有形成分被破坏，均可导致假阴性结果的出现[7]。

本研究结果显示，干化学分析仪和UF-1000i尿液流式细胞分析仪检测尿液中红细胞时均可出现假阴性和假阳性结果[5]，而且2种方法检测结果比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，显微镜检测红细胞具有直观、可靠、简便、特异度高的特点，但操作繁琐，精密度差，影响因素也较多。干化学分析法和UF-1000i尿液流式细胞分析仪联合使用可以提高工作效率，并且避免了单一方法带来的假阳性和假阴性，降低了人为误差，当二者出现结果不相符时，必须结合临床并以尿沉渣镜检为准，以提高尿常规分析中红细胞检测的准确度[8]。

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10.3969/j.issn.1009-5519.2015.05.035

:B

:1009-5519（2015）05-0728-02

2014-07-14

2014-10-06）

何朝树（1971-），男，山西汾阳人，主管检验师，主要从事医学检验工作；E-mail：316696320@qq.com。