崔一喆 王秋菊 张秀英 王春花 李广亮 齐 悦

(1.东北农业大学动物医学学院，哈尔滨 150030;2.黑龙江八一农垦大学动物科技学院，大庆 163319)

非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是以肝实质细胞脂肪贮积和脂肪变性为特征的临床病理综合征［1］。近年来，由于脂肪和高糖等摄入增加、激素食品泛滥等因素，使NAFLD发病率逐年增高。NAFLD在鸡、狗、猪、牛、羊以及鱼等动物也可发生，是各种动物的原发或者继发性疾病［2－3］，在鸡、鸭的发病率较高，给禽类养殖业造成了严的重经济损失［4］。有文献报道转录因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid 2-like 2，Nrf2)基因的缺失会明显加重NAFLD的进程［5］。Nrf2可降低肝脏对氧化应激的敏感性，保持肝脏功能的稳定以及阻止肝脏疾病的发生，在肝损伤、脂肪肝、肝纤维化及肝癌等方面具有保护作用［6］，但Nrf2是否会改变高脂饲粮诱导的肝细胞毒性尚不清楚。因此，本试验采用高脂饲粮诱导NAFLD模型，结合基因敲除，研究Nrf2基因缺失对NAFLD小鼠肝脏氧化应激的影响。

1 材料与方法

1.1 试验动物

野生型(wild type，WT)和 Nrf2基因敲除(knock out，KO)ICR 雄性小鼠，18 ～20 g，购自南京军区总医院实验中心，小鼠基因型鉴定由中国人民解放军南京军区总医院动物中心鉴定［鉴定号:SCXK(军)2007-012］，本实验室采用PCR法对小鼠基因型进行鉴定。小鼠分笼饲养，试验前空腹过夜，自由饮水。

1.2 高脂饲粮(high fat diet，HFD)的制备方法

胆固醇由天津虔诚伟业科技发展有限公司提供，批号:20100122;胆盐、糊精均由北京奥博星生物技术有限责任公司提供，批号:20120202;猪油为超市购买。HFD的配方由前期试验确定［7］，按照普通饲料68.5%、猪油15%、胆固醇1%、胆盐0.5%和糊精15%，称取各种成分，将胆固醇和胆盐与普通饲粮(normal diet，ND)粉末混合均匀，再加入熬制好的猪油，待混合均匀后，加入糊精和一定比例的水，用制粒机压制成型后，烘干备用。……