雅培i2000全自动电化学发光免疫分析仪剩余试剂检测结果分析

2015-12-19张爱民张桂芬

医疗卫生装备 2015年10期

张爱民，张桂芬

张爱民，张桂芬

目的：探讨雅培i2000全自动电化学发光免疫分析仪剩余试剂检测的可行性。方法：利用剩余试剂分别检测特定血清甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、糖类抗原199（carbohydrate antigen 199，CA-199）的浓度，进行精密度、准确度分析，并与原装试剂分别检测这3个项目的低、中、高3个浓度的同一组血清标本做均值比较及相关性分析。结果：剩余试剂检测AFP、CEA、CA-199的精密度变异系数（coefficient of variation，CV）均小于5%，符合相关标准，准确度结果较好；2种试剂检测血清样本结果呈良好的线性关系（r＞0.95），差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：雅培i2000全自动电化学发光免疫分析仪的剩余试剂可以进行AFP、CEA、CA-199检测，能够保证检验质量，降低检测成本。

全自动电化学发光免疫分析仪；剩余试剂；甲胎蛋白；癌胚抗原；糖类抗原199

0　引言

电化学免疫分析是电化学发光和免疫测定相结合的新一代标记免疫测定技术，现已广泛应用于各种激素、肿瘤标志物、药物及其他微量活性物质的测定[1-2]。雅培i2000全自动电化学发光免疫分析仪是目前检验科在免疫定量检测这一领域使用最为广泛的仪器之一，具有灵敏度高、结果准确、精密度及线性评价良好、交叉污染小等优点，可满足临床的要求[3]。其配套试剂为进口原装试剂，试剂盒独立包装，测定人份固定，扫描条码自动获取试剂信息，检测成本较高。在实际的工作中我们发现，每500人份试剂检测完毕后，还有一定量的剩余试剂，但仪器不会再进行检测，造成了试剂的浪费。经过测试，发现剩余试剂还能检测40份左右的标本。为了能够在保证检验质量和仪器性能的基础上，充分利用好这部分剩余试剂，降低检测成本，我们将剩余试剂的检测量定在了25人份，并以甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）、癌胚抗原（carcinotembryonic antigen，CEA）、糖类抗原（carbohydrate antigen199，CA-199）为例，对剩余试剂的精密度、准确性和相关性进行了检测和分析。

1　材料和方法

1.1材料

1.1.1仪器

美国雅培i2000全自动电化学发光免疫分析仪。

1.1.2试剂

原装试剂为雅培i2000 AFP配套试剂（批号30155LF00）、CEA配套试剂（批号32123L00）、CA-199配套试剂（批号29133M500）；剩余试剂为以上原装试剂完成规定检测人份，经仪器扫描后为“0TEST”的同批号同项目的试剂，分别准备3盒，加盖后放入2～6℃冰箱内保存备用；质控品为美国伯乐公司提供的TM1（批号54541）、TM2（批号54562）质控品。

2　结果

2.1精密度检测结果

精密度检测结果显示，所测结果CV均小于5%，在允许范围之内，结果见表1。

表1　精密度检测CV结果%

2.2准确度检测结果

用剩余试剂检测AFP、CEA、CA-199的TM1和TM2各10次，质控结果均在允许范围内，结果见表2。

表2　准确性检测结果（±s）

2.93±0.43 3.07±0.31 CEA/（ng·ml-1）10.33±0.83 10.40±1.00 AFP/（ng·ml-1）TM1组别剩余试剂原装试剂148.23±13.41 159.00±16.00 CA-199/（U·ml-1）TM2 AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）75.92±5.74 26.14±3.79 545.29±33.01 71.80±7.80 26.50±2.65 552.00±55.00

2.3标本检测结果

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2种试剂检测患者血清样品的结果呈良好的线性关系（r＞0.95），差异无统计学意义（P＞0.05），结果见表3。

表3　标本原装试剂与剩余试剂检测血清AFP、CEA、CA-199结果比较（±s）

组别低浓度血清　中浓度血清　高浓度血清AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）剩余试剂　7.58±0.29　3.61±0.13　15.86±0.61　86.25±2.83　63.46±2.08　166.42±6.48 329.71±14.86 478.92±20.64 846.76±34.93原装试剂　7.69±0.26　3.66±0.12　16.05±0.58　87.38±2.77　64.18±2.16　170.37±6.29 335.64±13.45 483.11±19.84 858.31±33.25 r值　＞0.95　＞0.95　＞0.95　＞0.95　＞0.95　＞0.95　＞0.95　＞0.95　＞0.95 P值　＞0.05　＞0.05　＞0.05　＞0.05　＞0.05　＞0.05　＞0.05　＞0.05　＞0.05

3　讨论

雅培i2000全自动电化学发光免疫分析仪采用化学发光微粒子免疫分析，将化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合，用于检测样品中的抗原、抗体和分析物。以吖啶酯为发光的标记物，固相载体为极细小的顺磁性颗粒，将包被了单克隆抗体的磁性微粒和待测标本加入到反应管中，标本中的抗原与微粒上的抗体结合，再加上吖啶酯标记的单克隆抗体，经过温育，形成固相包被抗体-抗原-吖啶酯标记复合物。经过洗涤、分离，将未结合的多余抗原和标记抗体洗去，加入氧化剂发光，这部分光的积分与被测抗原的量成正比，可从标准曲线上计算出待测物的含量。其测定原理与酶免疫中的双抗体夹心法和竞争结合法相似[4]。国内有文献对其综合性能进行了分析，并均给予了较高的评价[5-7]。

AFP、CEA、CA-199是临床应用较为广泛的肿瘤标志物，在肿瘤的筛查、诊断和疗效观察中有着重要的临床意义[8-9]。AFP是原发性肝癌的高特异性和高灵敏度的肿瘤标志物，在其他恶性肿瘤如睾丸癌、畸胎癌、胃癌、胰腺癌等也可以升高。CEA是一个广谱性肿瘤标志物，它能反映出多种肿瘤的存在。CA-199是糖抗原的一种，其增高多提示有胰腺炎、肝硬化、糖尿病、消化道肿瘤的可能。本实验从精密度、准确度、标本检测结果3个方面对剩余的AFP、CEA、CA-199配套试剂的检测性能进行了分析，所有检测均在室内质控在控的情况下进行。实验结果显示，用剩余试剂检测低浓度血清中的AFP、CEA、CA-199时，精密度CV分别为3.21%、3.06%、4.33%，检测高浓度血清中的相同指标分别为3.61%、3.42%、3.68%，均小于5%，符合临床工作要求[10]；准确度和重复性结果较好，2种试剂检测患者血清样品的结果呈良好的线性关系（r＞0.95），差异无统计学意义（P＞0.05）。实验结果说明500人份/盒同批号的剩余试剂检测25人份以内的标本能够达到性能稳定、质量可靠要求。

根据配套校准品说明书，同批号试剂可定标一次，稳定期为30 d，所以剩余试剂可不需再定标。剩余试剂操作方法：在主屏幕下选择Reagents，再选择Reagent history，选中测试量显示“0 TEST”的相应项目信息，点Delete键删除。将剩余试剂盒重新装载扫描后，仪器试剂库存恢复到“500 TEST”时即可进行剩余试剂的使用。使用剩余试剂的注意事项有：（1）删除试剂盒前应先扫描一盒同批号的相应新试剂盒，扫描后取出，以保存试剂的相应信息，避免再次定标。（2）剩余试剂当天不能使用时应及时取出，加盖放入2～6℃冰箱，在1周内使用完毕。（3）剩余试剂的检测量一定要小于25人份，否则会影响检测结果和仪器的性能。（4）为保证结果的准确性，每次使用应带着室内质控严密监控。

综上所述，雅培i2000全自动电化学发光免疫分析仪剩余AFP、CEA、CA-199配套试剂可以用于临床检测。在实际工作中，操作方法简单、检验结果准确，能够降低检验成本，减少资源的浪费。

[1]吕世静.临床免疫学检验[M].2版.北京：中国医药科技出版社，2010：122.

[2]Hermsen D，Broecker-Preuss M，Casati M，et al.Technical evaluation of the first fully automated assay for the detection of TSH receptor autoantibodies[J].Clinical Chimica Acta，2009，401：84-89.

[3]张保平，董莉，冯新平，等.雅培ARCHITECT i2000化学发光仪测定6种肿瘤标记物项目的方法学性能评价[J].国际检验医学杂志，2011，32（4）：488-490.

[4]吴健民.临床化学自动化免疫分析[M].北京：科学出版社，2000：166.

[5] 郭楠，高亚哲，杨琦.雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪性能评价方法研究[J].中国医药科学杂志，2013，3（7）：75-76.

[6]王恒，梁鑫，蒙飞.雅培ARCHITECT i2000化学发光仪测定肿瘤标记物的线性评价[J].检验医学与临床，2012，9（19）：2 503-2 504.

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[8]朱勇.血清TSGF、CEA、AFP、CA724、CA199联合检测在胃癌诊断中的价值[J].山东医药，2011，51（14）：45-46.

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[10]朱波，沈伟，黄家勤，等.ARCHITECT I2000SR化学发光仪甲胎蛋白残留试剂再利用性能评估[J].国际检验医学杂志，2013，34（24）：3 397-3 399.

（收稿：2014-10-30修回：2015-02-15）

Analysis on detection results by remaining reagent of Abbott i2000 automatic electrochemical luminescence analyzer

ZHANG Ai-min,ZHANG Gui-fen
（Department of Clinical Laboratory,the Affiliated Hospital of Logistics University of PAP,Tianjin 300162,China）

Objective To explore the feasibility of detection by using remaining reagent of Abbott i2000 automatic electrochemical luminescence analyzer.Methods The remaining and original reagents of the analyzer were both used to detect the concentrations of AFP,CEA and CA-199 in low-,medium-and high-concentration serums,the precisions and accuracies were analyzed,and the mean comparison and correlation analysis were carried out.Results The remaining reagent had the precisions for AFP,CEA and CA-199 all less than 5%which accorded with the national standard,and also behaved well in the accuracy.There was a high correlation between the detecting results by the remaining and original reagents,with r＞0.95 and P＞0.05.Conclusion The remaining reagent of Abbott i2000 automatic electrochemical luminescence analyzer can be used to test AFP,CEA and CA-199,with detection quality ensured and cost decreased.[Chinese Medical Equipment Journal，2015，36（10）：100-102]

automatic electrochemical luminescence analyzer;remaining reagent;AFP;CEA;CA-199

[中国图书资料分类号]R318.6；TH776A

1003-8868（2015）10-0100-03

10.7687/J.ISSN1003-8868.2015.10.100

张爱民（1970—），女，主要从事临床检验方面的研究工作，E-mail：zhang_ai_min@sina.com。

300162天津，武警后勤学院附属医院检验科（张爱民，张桂芬）通讯作者：张桂芬，E-mail：563295075@qq.com

1.1.3标本

1.2方法

1.2.1检测仪器的准备

原装试剂完成规定检测人份后，对仪器做相应设定：ready状态→Reagents→Reagents history→选定“0 TEST”相应项目试剂盒→Delete删除，重新运行仪器，重新扫描后的“0 TEST”试剂盒恢复为“500 TEST”即可检测。

1.2.2精密度检测

分别选取低、高2种浓度的患者混合血清，用原装和剩余试剂分别重复检测10次，计算变异系数（coefficient of variation，CV）。