杨 婷， 廖美德， 刘偲嘉， 贺玉广， 林志峰

（华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室，广东广州510642）

羽毛角蛋白粗蛋白质含量约在80%以上，氨基酸含量在70%以上（傅红梅，1997），并且含有矿物质元素、维生素以及一些未知的生长因子，是良好的饲料用蛋白资源（张启等，2007）。但由于其结构中含有大量二硫键，一般方法很难将其降解，因此利用率较低。本实验室初步筛选得到两株可降解羽毛的真菌，分别为米曲霉和淡紫拟青霉。本试验对两种菌种降解羽毛能力进行初步对比，筛选出较适合生产需要的菌种，并添加枯草芽孢杆菌酶液，对酶菌联合降解羽毛的能力进行研究，为工业化生产提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料 米曲霉菌 （Aspergillus oryzae）、淡紫拟青霉（Paecilomyces lilacinus）和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）由华南农业大学实验室保存；羽毛粉由广州康顺饲料公司提供。

1.2 含羽毛的察氏培养基制作 以察氏培养基为出发培养基，以羽毛替代其原有氮源，制作改良察氏培养基，在1000 mL的锥形瓶中，每个锥形瓶中均装入200 mL液态培养基，灭菌后备用。

1.3 孢子悬液的制备 将米曲霉 （或淡紫拟青霉）接种到固体PDA中，置于28℃恒温培养箱中保温培养，待培养基表面大量形成孢子时，向培养皿中加入无菌水，洗涤米曲霉孢子，合并洗涤孢子悬液后备用。

1.4 羽毛降解试验 在制备好的羽毛培养基中，分别按2%的接种量接种米曲霉或淡紫拟青霉的孢子悬液，置于30℃、180 r/min的恒温摇床中培养，每24 h取样，抽滤，测定滤液中氨基酸的含量。……