马小妮，石文贵，谢艳芳，马慧萍，甄 平，陈克明

(兰州军区兰州总医院骨科研究所，甘肃兰州 730050)

随着我国人口日趋老龄化，骨质疏松症的发病率迅速升高。该病主要是由于骨吸收大于骨形成，从而导致骨丢失的一种严重威胁中老年人健康的常见病［1-3］。自从Yang等［4］报道了运用激素替代疗法(hormone replacement therapy，HRT)治疗骨质疏松会增加心血管疾病和乳腺癌的发病率，很多学者纷纷转向寻找其它治疗骨质疏松的天然疗法。近年来，一些研究显示，淫羊藿苷具有促进骨髓基质细胞骨形成活性和抑制破骨细胞骨吸收活性［5］。不过，上述研究是在传统的成骨分化诱导剂存在的条件下得出淫羊藿苷具有促进骨髓基质细胞骨形成活性的结论。传统的成骨分化诱导剂的配方为:1× 10-8mol·L-1地塞米松(dexamethasone)、10 mmol·L-1β-甘油磷酸钠(β-glycerophosphate)和 50 g·L-1磷酸化维生素 C(L-ascorbic acid-2-phosphate)［6］。其中，β-甘油磷酸钠和磷酸化维生素 C主要促进大鼠骨髓基质细胞的矿化［7-8］，地塞米松对大鼠骨髓基质细胞的分化有重要作用［9］。本实验主要观察在无成骨分化诱导剂(地塞米松)时淫羊藿苷对大鼠骨髓基质细胞成骨性分化的影响，以期寻找一种新的或更强的促体外培养大鼠骨髓基质细胞成骨性分化的诱导剂。

1 材料与方法

1.1 试剂 DMEM培养液(Gibco)，无酚红DMEM培养液(Gibco)，标准胎牛血清(兰州民海生物公司)，Ⅱ型胶原酶、胰蛋白酶、地塞米松(Sigma)，活性炭处理的胎牛血清(CSFBS，Biowest)，淫羊藿苷(中国药品生物制品检定所，纯度＞98%)，RNA提取试剂(RNAiso Reagent)、反转录试剂盒(Prime ScriptTMreagent Kit)、RT-PCR试剂盒(SYBR Premix Ex TaqTMⅡ)(大连宝生物公司)，BCA蛋白定量试剂盒(武汉博……