史正明 （青海省共和县畜牧兽医站 813000）

仔猪巴氏杆菌病病原的分离与鉴定

史正明 （青海省共和县畜牧兽医站 813000）

采取病死仔猪的心、肝、脾、肺、肾、淋巴结等病料，进行多杀性巴氏杆菌病病原的分离培养与鉴定。根据流行病学资料、临床症状、病理变化和实验室检查结果，确诊为仔猪巴氏杆菌病。同时，通过药敏试验筛选出敏感药物并有效控制了疫情。

猪多杀性巴氏杆菌病又称“猪肺疫”、“锁喉风”，是由条件性多杀性巴氏杆菌引起猪的一种急性、热性传染病。2013年3月，青海省某县一个体养猪场饲养的仔猪突然发病、死亡。发病9头，发病率13.43%，死亡率44.44%。其临床症状为：病猪体温升高至40～41℃，个别体温超过42℃，食欲下降，继而废绝。颈下咽喉部发热、红肿、坚硬，甚至延至耳根、前胸，病猪鼻流粉红色黏稠液体，呼吸困难，张口吐舌，作犬坐姿势，可视黏膜发绀，颈部有明显的水肿。病猪初便秘，后腹泻。病理变化：颈部咽喉及周围结缔组织，有大量冻胶样淡黄或灰青色出血性浆液清润，全身黏膜、实质器官及淋巴结广泛出血，切面红色，心包膜心外膜有出血点，胃肠黏膜出血性炎症，脾出血肿大，个别猪肺脏有纤维素性样变，并伴有水肿和气肿，胸腔及心包腔有较多量的淡黄色积液。现将病原的分离培养与鉴定、药敏试验及治疗，结果报告如下：

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 病料采集 无菌采取病死仔猪的心、肝、脾、肺、肾及淋巴结等脏器12份，置4℃箱待检。

1.1.2 培养基 鲜血琼脂培养基、血清琼脂培养基及各种生化试验培养基均由本实验室自制。

1.1.3 试验动物 健康昆明系小白鼠2只(14～15g)，购于青海生物药厂。

1.1.4 药敏试验 抗生素药敏纸片购自上海伊华医学科技有限公司。抗菌素种类P-G(青霉素)、NOR(氟哌酸)、OXA(苯唑青霉素)、CTX(头孢噻肟)、CAR(羧苄青霉素)、KAN(卡那霉素)、VAN(万古霉素)、GEN(庆大霉素)CMP(氯霉素)、TET(四环素)、STR(链霉素)、CFZ(头孢唑啉)12种。

1.2 方法

1.2.1 触片染色镜 将病料触片，进行革兰氏染色、美兰染色，镜检。

1.2.2 分离培养 无菌采取各病料，分别接种于鲜血琼脂平板，37℃培养18～24h，随后进行纯化培养。

1.2.3 生化试验 用灭菌接种环勾取少许纯培养物接种于各种生化培养基中，37℃培养18～24h后观察结果。

1.2.4 动物试验 将纯培养物制成悬液注射小白鼠2只，0.2ml/只。

1.2.5 药敏试验 用灭菌生理盐水将纯化好的培养物洗下，稀释后并与麦氏比浊管比浊后选取3×10个活菌/ml量的浓度，用灭菌棉拭子蘸取菌液均匀涂布到整个血清琼脂培养基上，经温箱干燥3～5min后，贴上各种药效纸，每块平均贴3块，37℃倒置培养18～24h后判定结果。

2 结果

2.1 触片染色镜检

镜下见革兰氏阴性、散在小杆菌；美兰染色镜检，见大量两极浓染的小杆菌。

2.2 菌落形态及培养特性

在鲜血琼脂培养基上形成灰白色、圆形、微隆起、半透明、湿润、表面光滑、边缘整齐的露珠样小菌落，不溶血。

2.3 生化试验

结果见表1

表1 巴氏杆菌的生化试验结果

2.4 动物试验

2只小白鼠在24h内死亡，从死亡小白鼠的脏器中分离到注射菌株一致的革兰氏阴性小杆菌。

2.5 药敏实验 结果见表2。

表2 巴氏杆菌药敏试验结果 (mm)

3 讨论

（1）根据病史、临床症状、病理变化和实验室诊断，确诊为仔猪多杀性布氏杆菌病。（2）由于巴氏杆菌为条件性致病菌，所以巴氏杆菌病的流行与猪的抵抗力有密切关系，不良因素的刺激易引起该病的发生和传染。猪群中发生巴氏杆菌病时，一般不易查出传染源，

这与动物在发病前已经带菌有关，而且该病多在冬春两季气温骤变及长途运输等应激条件下，机体抵抗力降低时病原侵入并大量繁殖，经淋巴液进入血液，发生内源性传染。本病发生在2013年3月初，由于寒冷、气候剧变、营养缺乏等因素，造成发病。（3）发病后立即隔离病猪，对圈舍、用具等用生石灰严格消毒，2次/d，连用5d，对病死仔猪进行深埋处理。（4）通过药敏试验筛选出敏感药物对病仔猪进行治疗。在12种抗生素中仔猪巴氏杆菌对P-G(青霉素)、CFZ(头孢唑啉)、CAR(羧苄青霉素)等抗生素高度敏感；对CTX(头孢噻肟)、TET(四环素)、NOR(氟哌酸)、CMP(氯霉素)等抗生素中度敏感；而对VAN(万古霉素)、OXA(苯唑青霉素)、KAN(卡那霉素)、STR(链霉素)等抗生素不敏感。由于巴氏杆菌病常与其它疫病并发，所有在治疗时应考虑可能存在的其它疫病，采用广谱抗菌药与特效抗生素结合，对症治疗。发病后用青霉素(2万µg/㎏)肌肉注射，2次/d，连用5d。通过采取以上防治措施，疫情得到了及时控制。（5）多杀性巴氏杆菌不仅在病畜全身各组织、体液、分泌物及排泄物中存在，而且也存在于健康家畜的上呼吸道中，所有接种疫苗是此病的主要防治措施。此外，应激反应也可以引发猪肺疫。故平时还应做好猪群的饲养管理，搞好环境卫生。避免各种应激因素刺激，加强消毒，有效预防猪巴氏杆菌病。

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1007-1733(2015)09-0032-02

2015–06–19）