赵丹，刘长军，吴磊

（国防科学技术大学理学院生物信息研究中心，湖南长沙410073）

少棘蜈蚣候选杀虫肽κ－SLPTX－Ssm2b的原核表达与纯化

赵丹，刘长军，吴磊*

（国防科学技术大学理学院生物信息研究中心，湖南长沙410073）

通过搜索NCBI数据库，获得了与具有昆虫毒性的少棘蜈蚣毒素κ－SLPTX－Ssm2a高度同源的毒素分子κ－SLPTX－Ssm2b.通过密码子优化并全基因合成获得了其DNA序列，利用RF－cloning技术将κ－SLPTX－Ssm2b插入到表达载体pet－HIS－SUMO，通过自动诱导表达技术在大肠杆菌BL21（DE3）诱导融合蛋白表达，通过镍柱纯化并用Ulp1激酶切割sumo标签并释放毒素分子，通过MALDI－TOF质谱鉴定其分子量为3 390.4658 Da.研究结果表明获得了与理论分子量（3391.04 Da）一致的κ－SLPTX－Ssm2b目的毒素分子，其表达产量为2.1mg/L，为进一步研究该候选杀虫肽分子的生理活性奠定了基础.

原核表达；少棘蜈蚣；κ－SLPTX－Ssm2b；大肠杆菌BL21（DE3）；杀虫肽

化学杀虫剂自发现以来，在预防和治理农业林业害虫以及传播病毒的昆虫方面一直处于霸主的地位.随着时间的发展，一些化学杀虫剂的毒副作用也逐渐暴露出来，这对生态环境产生了极大的影响.例如DDT，其稳定的化学结构，在生态环境中有残留难以降解，且能够在动物体内富集［1］.研究表明，鸟类体内含有DDT会导致其壳蛋变软无法孵育，在南极洲企鹅体内已经检测出DDT的残留，这无疑对生态环境造成了严重的威胁［2－5］.由于老旧化学杀虫剂对害虫和生态系统均有毒害作用，开发一种具有专一作用于害虫，但对其他生物以及环境危害小的新型杀虫剂就显得尤为重要.

蜈蚣是典……