范雅丽

摘要 对酶抑制检测法和化学试剂速测法的检测方法和原理进行了概述，有助于区别蔬菜水果中有机磷农药残留的其他速测方法，可为蔬菜、水果中农药残留检测技术的提高提供参考。

关键词 蔬菜；水果；检测技术；农药残留

中图分类号 TS207.5+3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2015）18-0289-02

Summary on Common Fruits and Vegetables Pesticide Residue Detection Technology

FAN Ya-li

（Agricultural Product Quality Safety Supervision and Management Station in Qingyang City of Gansu Province，Qingyang Gansu 745000）

Abstract This paper summarized the test method and principle of the enzyme inhibition test and chemical reagents speed measuring method，which helped to distinguish other measuring methods of organophosphorus pesticide residues in fruits and vegetables，so as to provide references for the improvement of detection technology of pesticide residue in fruits and vegetables.

Key words fruits；vegetables；detection technology；pesticide residue

近年来，我国对蔬菜农药残留的检测技术虽然一直在完善，但是蔬菜农药残留引发的中毒事件也在频繁发生，政府及相关部门对检测技术的要求也越来越高。蔬菜农药残留污染主要是有机磷类的和氨基甲酸类，有机磷类的超标情况尤其明显。我国现有的测定农药残留的方法主要有4种，即酶抑制检测、色谱检测、酶联免疫以及化学试剂速测法。本文主要就酶抑制法、化学速测进行了研究，因他们都有相对较低的使用成本，易于推广。

1 酶抑制法

1.1 检测原理

在环境特定的情况下，有机磷可以抑制胆碱酯酶的相应功能，即催化水解过程的基本功能，同样，氨基甲酸酯类农药也有相同的抑制作用。蔬菜和水果中农药的浓度越大，它的抑制能力也会相对增强。对其进行抑制的基本原理是，氨基甲酸酯类农药或者有机磷和乙酰胆碱酯酶经过化学反应后就抑制了酶的活性，如果将拟除虫菊酯类农药和AchE经过相应的化学反应后就抑制不了酶的活性。AchE和样本经过化学反应后抑制了酶的活性，说明蔬菜或者水果中包含着对人体神经有害的物质，反之，没有抑制酶的活性，说明蔬菜和水果中基本没有对人体有害的物质[1]。在进行试验的时候所采用的试剂分别是显色剂、缓冲液、底物以及胆碱酯酶。

1.2 检测步骤

把样本，即蔬菜或者水果的样本取出来，擦掉上面黏着的泥土和水之类的东西，取出1 g样本之后将其切碎，如果不是带叶的蔬菜就取出2 g。在取出的样本里面加入5 mL缓冲液，并摇晃2～3 min不等，将提取液倒出静置5 min，接着给比色杯内加入样本的提取液和酶，分别为2.5 mL、100 μL，10 min后加入100 μL显色剂，然后加入100 μL底物，将两者充分混合后再进行比色，比色环节必须在412 nm长的波长下进行。酶抑制法的基本计算公式如下：

抑制率（%）=（？驻AC-？驻AS）/？驻AC×100

式中，？驻AC是对照样本3 min后与3 min前吸光值之差，？驻AS是被测样本3 min后与3 min前吸光值之差。

1.3 判定结果

当对酶的抑制率<50%的时候，在蔬菜和水果上农药残留的数量就会趋近于没有；当抑制率在50%～70%之间的时候，蔬菜或者水果中存在这2种农药残留的可能性会比较大；当抑制率≥70%的时候，表示这2种农药残留肯定是存在的。通过一些气相色谱仪等检测工具进行定量定性监测的时候，-10%～110%之间的数字就表示其抑制率必须保持的范围，假如超过了这个范围就说明这个操作过程是错误的，必须把检测过程再重新来1遍。

1.4 结果判定标准

要对试验结果进行准确判定就必须遵照相关仪器测得的数据，每个测定仪器都有规定的测定范围。很多速测法可以通过目测的方式进行农药残留物的测定，即颜色会把阳性和阴性数据显示出来。超标是阳性的，比如在使用速测灵I型和新灵的时候，检测液体的颜色逐渐从紫色变成无色时就表示超标，如果紫色根本没有发生变化或者变化不明显，仍可以看出是紫色液体，说明农药残留没有超标，即显示阴性。速测卡颜色的变化也会显示超标和不超标，速测卡如果完全变为蓝色就表示农作物残留没有超标，如果速测卡的颜色没有发生任何变化就表示农作物残留超出了标准规定的范围。还有一些检测仪的亮灯颜色变化也会体现出超标和不超标的情况[2]。

1.5 试验结果和分析

在整个研究试验中，采用了快速检测方法即酶抑制法进行了对有机磷类农药残留的监测，最后确定了农药残留浓度。本文主要采用酶抑制法，依据国家标准《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测（GB/T 5009.199—2003）》和行业标准《蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法（NY/448-2001）》和化学检测法做了相关的对比试验。酶抑制法能快速检出被测样品中的农药残留量，广泛应用于蔬菜、水果、粮食、茶叶、水及土壤中有机磷和氨基甲酸酯类的农药残留进行的快速检测中，适用于各级农产品检测中心、工商、技术监督、卫生监督、食品药品监督管理局、农产品加工企业、农产品种植基地、种植专业合作社、农贸市场、生鲜超市、学校、环保部门、宾馆、酒店等领域[3]。endprint

最后对试验结果进行验证之时，采用了气相色谱的方法对酶抑制法的监测结果进行了验证，通过检测结果来看，阳性的结果符合率明显大于阴性结果符合率，阳性的是83%，阴性的是77%。在室内温度和湿度都进行严格的控制之下，即室温控制在25～28 ℃，室内湿度控制在50%的时候对试验结果进行测定，这次选取的是对这4种有机磷反应较为灵敏的RP_410型农药残留快速测定仪，这个测定仪可以检测到0.5 mg/kg，CL-1型农药残留测定仪再对农药残留进行测定，测定结果是有0.5 mg/kg，甲胺磷和久效磷的测定数据都相对较大，分别为1、2 mg/kg。换一种检测方式检测到的结果也不同，利用新灵对甲胺磷、敌敌畏进行测试时，可以检测到1 mg/kg，也可以检测到4 mg/kg的氧化乐果。甲胺磷、敌敌畏、久效磷可以用速测灵I型检测到3 mg/kg，也可检测到5 mg/kg的氧化乐果。速测卡的检测标准最差是6 mg/kg。

2 化学试剂速测法

2.1 检测原理

研制金属离子催化剂，利用这种金属离子催化剂使得像磷酸酯之类的有机农药进行催化水解，最后水解成为磷酸和醇。有机磷农药在强催化剂和监测液B的催化之下，分解形成了磷酸和醇。然后对颜色呈紫色的检测液A进行研究，这样有机磷进行水解之后的产物和检测液A进行反应之后，颜色会发生非常明显的变化，即紫色最后会逐渐变浅，最后呈无色状态[4]。

2.2 检测步骤

首先，取3～4 mL蒸馏水或者洁净水，如果没有具体测量的物品，可以在包装中找出塑料测试盆，把纯净水倒入塑料测试盆的1/5的位置；然后，把有柄的蔬菜叶片取出来2～3片，要求蔬菜叶片舒展，接着清洗叶面，注意要在纯净水通了吸管之后用吸管进行清洗。接着，再取出一个吸管，把三角瓶中存储的紫红色液体吸取出来，在盆子里滴2滴，摇晃使之混合均匀，然后再取出塑料瓶中存储的黄色液体，并将这些液体吸取4滴，滴入到盆子内部，经过振动摇晃后静置5～10 min后再观察颜色变化情况。

2.3 结果判断

如果这几种液体混合之后颜色都变为无色，则说明这些蔬菜中有机磷的含量大幅度超出了标准量，是不能进行食用的，否则将会产生中毒现象。如果一次测定还不能满足相应的测定结果，那么可以对这项内容重复测定3～4次，以得出比较实用的结果。

3 速测方式的技术指标

化学速测法是根据有机磷农药的氧化还原特性进行检测的方法。有机磷农药比如磷酸酯、二硫代酸酯、磷酸胺在金属催化剂作用下水解为磷酸及醇等，水解产物与显色剂反应，使显色剂的紫红色褪去变成无色。其检测步骤为：取农药溶液3～4 mL，加入紫红色显色剂液体2滴混匀。再加入黄色催化剂液体4滴静5～10 min，如果液体褪色则表示农药残留超标。该方法的优点在于它是化学反应，相对生化方法稳定，操作简便无需培训，一次可做多个样品，检测所需时间短。该方法的缺点是在临界点附近颜色变化不很明显，主要针对几种有机磷农药敏感，且易受一些还原性物质的干扰[5]。速测卡法和分光光度法是国家标准快速检验方法规定的2种快速检测的生化方法。本仪器采用了最快捷、最简单的速测卡法。速测卡中的胆碱酯酶（白色药片）可催化靛酚乙酸酯（红色药片）水解为乙酸与靛酚。由于有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的活性有抑制作用，使催化水解后的显色发生改变，利用速测卡法测量显色的不同，即可判断果蔬样品是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留情况。

按照已经得到的相关数据结果和使用相关仪器的技术资料，对几种速测方法进行比较，比如灵敏度、成本、重现性、检测速度、操作过程等。就速测卡来看，没有较高的灵敏度，所需要的成本非常高。而惠康速测仪的劣势是重现性较差，新灵和SN-IA型速测仪的优点是比较明显的，即检测速度相当快，灵敏度相对较高，操作实行起来简单方便，成本也相对较低。但是，ZYD-NP6 和OK-C10的优点和缺点都较为明显，其优点都具有较为宽阔的检测对象，重现性也相对较好，但是缺点是操作试验的过程太过复杂，对酶的保存条件也有较高要求，而且结果也会随着环境、组织液的色素、操作技巧等发生的变化而产生相应的变化，受到的影响较大[6]。

4 结语

就现在科学技术的发展水平来看，检测蔬菜农药残留的方法主要有2种，一种是色谱法，另外一种是速测法，本文主要针对速测法中的2种进行了概述。酶抑制法和化学速测法主要是定性分析化学残留，针对含有过高浓度农药残留的蔬菜或者水果进行药性检测，以防止在农产品之中由于过高的农药残留物而导致的中毒事件的发生。酶抑制法和化学速测法在这个过程中起到的作用是有目共睹的。其他诸如色谱法之类的速测方法也有其特定的优势和特点，因此，在环境的需要发生相关变化的情况下，可以将速测方式进行相应的改变，以达到最终速测效果实现的目的。

5 参考文献

[1] 张丹，王俊红，曾正宏.分散固相萃取—气相色谱法测定蔬菜中多种有机磷农药残留[C]//第十届中国化学会分析化学年会暨第十届全国原子光谱学术会议论文集.扬州：[出版者不详]，2009.

[2] 赵建伟，岳永德，汤锋，等.气相色谱法测定蔬菜、水果中多种有机磷农药残留[J].安徽农业大学学报，2010（1）：82-87.

[3] 郑斌，黎其万，邵金良，等.温度对酶抑制法测定蔬菜有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的影响[J].广东农业科学，2012（3）：108-109.

[4] 曹赵云，牟仁祥，吴俐，等.程序升温大体积进样和解卷积气相色谱—质谱法测定蔬菜水果中32种农药残留量[J].色谱，2014（12）：1390-1399.

[5] 王秋渝，张福金，尹鑫，等.普通白菜中有机磷类农药残留检测定量限的试验研究[J].内蒙古农业科技，2012（6）：40-41.

[6] 胡业琴.基于介孔氧化铝的固相萃取及其在食品中农药残留分析的应用研究[D].重庆：重庆大学，2014.endprint