邢军芬，汪涛，张莹，朱滨

·论著·

CYP2C19显色型基因芯片的研究

邢军芬，汪涛，张莹，朱滨

目的提供一种基于显色原理的CYP2C19基因芯片诊断方法。

方法采用碱性磷酸酶促显色原理设计制备固定有*2、*3检测探针的CYP2C19基因芯片，通过EDTA抗凝外周血样本提取基因组DNA，PCR扩增CYP2C19*2、*3突变片段并与芯片在43℃杂交，经洗涤、显色后扫描获取图像，经软件分析输出基因型并对基因芯片性能进行系统评价。

结果CYP2C19显色型基因芯片检出限为20 ng基因组DNA；与基因组DNA同等浓度鱼精DNA检测信号阴性；用*2/*2、*1/*3基因型样本重复检测10次，结果一致；常见浓度的甘油三酯、总胆固醇、胆红素和完全溶血对测定没有影响。临床三家医院临检实验室对1000例临床样本的检测与双向测序方法比对验证，结果一致。

结论为高通量基因诊断产品的产业化提供了一种实用的技术选择。

芯片分析技术；多态性，单核苷酸；基因分型技术；CYP2C19

基因芯片技术（即基因微阵列），是近年来发展起来的一种快速、高效核酸分析手段，美国FDA、中国CFDA均已批准基于基因芯片技术的基因诊断试剂上市，并广泛用于病源耐药基因筛查，疾病相关基因诊断和个体化用药基因诊断等［1-3］。但目前的基因芯片产品主要采用荧光检测原理，存在主要荧光标记原料被少数公司专利垄断，采用激光光源的荧光检测设备价格不菲，荧光信号易受光照等因素干扰导致重现性不佳，CV值偏大，检测后的芯片不能长期保存等不足，阻碍了该技术的产业化。

本研究旨在研究一种能克服上述不足的，基于显色原理的基因芯片技术，并用于CYP2C19基因多态性检测。……