杨新周

(德宏师范高等专科学校理工系，云南德宏678400)

甘蔗是一种广泛种植于我国福建、广东、海南、广西、四川、云南等地区的经济作物，是全世界热带糖料生产国的主要经济作物［1］。甘蔗除了制糖、造纸、作饲料、酿酒之外，还可以作为药材。经过前人研究，甘蔗中含有大量的多酚及黄酮类物质［2，3］。甘蔗的应用部位主要为茎，而甘蔗花和甘蔗叶应用较少。有时，甘蔗叶和甘蔗花就直接在地里焚烧为灰肥，或是作为家畜的饲料。为了寻求甘蔗叶和甘蔗花的综合利用价值，本文以甲醇和乙醇为溶剂，采用超声提取法对甘蔗花及甘蔗叶进行提取，考察其对DPPH自由基活性的清除能力，以期为甘蔗花和甘蔗叶的综合利用提供理论依据。

1 实验部分

1.1 主要仪器和试剂

722型可见分光光度计(上海菁华科技仪器有限公司)，超声波发生器(AS20500A)，电子天平(AR224CN)，电热真空干燥箱(ZK 82J型)，旋转蒸发仪(EYELA N一1100)。

DPPH(1，1－二苯基－2－三硝基苯肼)，质量分数＞99.0%，国药集团化学试剂有限公司生产;甘蔗叶、花(云南省德宏傣族景颇族自治州盈江县，烘干，粉碎，过筛);槲皮素、山奈酚、咖啡酸、芦丁，购自国药集团浙江华东医药有限公司，质量分数＞98%;甲醇、乙醇等试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。

1.2 实验内容及方法

1.2.1 DPPH储备液的制备

准确称取10 mg DPPH，用无水乙醇溶解定容至100 mL容量瓶中，得到质量浓度为0.1 mg/mL的储备溶液。然后稀释成质量浓度为0.024 mg/mL的标准溶液。

1.2.2 甘蔗叶和花提取物的制备

准确称取2.000 0 g样品于100 mL的锥形瓶中，加入20 mL的乙醇溶液，封口，超声提取3次，每次45 min。合并3次滤液于旋转蒸发仪中浓缩，转移到25 mL的容量瓶中，乙醇定容，备用。利用此法制备甲醇提取物溶液。

1.2.3 清除DPPH自由基能力的测定

准确移取4.5 mL DPPH标准溶液，依次加入一定体积的提取物稀释液于10 mL比色管中，定容至5 mL，置于暗处30 min。在波长517 nm下，测定空白DPPH的吸光度度值，记为A空白，加入提取物后DPPH的吸光度值为A样品，按下式计算自由基清除率［6］。

配置一定浓度的标准品试液，以同样的方法，测定标准品清除DPPH自由基的活性。

2 结果与讨论

2.1 标准品清除DPPH自由基的活性

按照1.2.3的方法测定标准品清除DPPH自由基活性的能力，结果见图1、图2及表1。

图1 芦丁、没食子酸、咖啡酸对DPPH自由基的清除率Fig.1 Rutin，gallic acid，caffeic acid on DPPH radical scavenging rate

图2 香草酸、对香豆酸对DPPH自由基的清除率Fig.2 Vanilla acid，p－coumaric acid on DPPH radical scavenging rate

表1 几种不同标准品清除DPPH自由基活性比较

从图1、图2中看出，几种标准品质量浓度与DPPH自由基清除率成一定的线性关系。几种标准品质量浓度与DPPH自由基清除率线性方程如表1。从表1及图1、图2中还得出，几种标准品抗氧化能力顺序为:没食子酸＞咖啡酸＞芦丁＞香草酸＞对香豆酸。

2.2 甘蔗花与甘蔗叶乙醇提取物清除DPPH自由基的能力

按照1.2.3的方法测定甘蔗叶与甘蔗花乙醇提取物清除DPPH自由基活性的能力，实验结果见图3。

图3 甘蔗花与甘蔗叶乙醇提取物对DPPH自由基的清除率Fig.3 The ethanol extract of flowers and leaves of cane sugar on DPPH radical scavenging rate

甘蔗花和甘蔗叶的乙醇提取物的质量浓度与DPPH清除率线性方程分别为:Y=62.696X+12.751，R2=0.992 3，IC50=0.594 1;Y=24.717X+19.394，R2=0.990 1，IC50=1.238 2。从图3 中看出，甘蔗花与甘蔗叶乙醇提取物在同等浓度下，甘蔗花提取物比甘蔗叶提取物清除率要强。结合两者清除DPPH自由基IC50，甘蔗花乙醇提取物清除DPPH自由基的能力大于甘蔗叶乙醇提取物的清除能力。

2.3 甘蔗花与甘蔗叶甲醇提取物清除DPPH自由基的能力

按照1.2.3的方法测定甘蔗叶与甘蔗花甲醇提取物清除DPPH自由基活性的能力，实验结果如图4。

甘蔗花和甘蔗叶的甲醇提取物的质量浓度与DPPH清除率线性方程分别为:Y=114.4X+19.347，R2=0.992 8，IC50=0.267 9;Y=59.583X+21.074 ，R2=0.990 5，IC50=0.578 5。从图4中看出，同等浓度的甘蔗花与甘蔗叶甲醇提取物清除DPPH自由基的能力存在明显差异。根据甘蔗花和叶甲醇提取物的IC50及图4可知，甘蔗花甲醇提取物清除DPPH自由基的能力大于甘蔗叶甲醇提取物的清除能力。

图4 甘蔗花与甘蔗叶甲醇提取物对DPPH自由基的清除率Fig.4 The methanol extract of flowers and leaves of cane sugar on DPPH radical scavenging rate

3 结论

通过实验得出，甘蔗花与甘蔗叶的甲醇、乙醇提取物及标准品清除DPPH自由基的活性活性顺序为:没食子酸＞咖啡酸＞芦丁＞甘蔗花甲醇提取物＞香草酸＞甘蔗叶甲醇提取物＞甘蔗花乙醇提取物＞甘蔗叶乙醇提取物＞对香豆酸。甘蔗花的甲醇提取物抗氧化能力强于香草酸及对香豆酸，可能是甘蔗花中存在黄酮类及多酚类物质所致。因此，甘蔗花的甲醇提取物是一种值得开发的天然抗氧化剂。

［1］吴建中，欧仕益，汪勇.甘蔗叶中黄酮类物质的提取及其抗氧化性研究［J］.现代食品科技，2009，25(2):165－167.

［2］丰永红，于淑娟，李国基.DPPH法测甘蔗提取物抗氧化活性研究［J］.甘蔗糖业，2003(1):31－33.

［3］区惠敏，郭娟，龚玉石，等.甘蔗渣多酚的纯化及抗氧化活性研究［J］.现代食品科技，2013，29(7):1596－1600.