杨慧慧

【摘要】 目的 评估巢式-实时荧光定量PCR法检测慢性乙型肝炎患者PBMC中HVB cccDNA的实用性。方法 利用巢式-实时荧光定量PCR法检测慢性乙型肝炎患者肝组织和PBMC中HVB cccDNA水平。结果 20例血清HBV DNA均为阳性的慢性乙型肝炎患者肝组织和外周血PBMC中ccDNA阳性率分别为55%（11/20）和45%（9/20），两者的符合率为90%。结论 利用巢式-实时荧光定量PCR法检测慢性乙型肝炎患者PBMC中HBV cccDNA能较真实地反映HBV的复制。该方法可能是一种评价抗病毒药物的疗效，观察乙型肝炎患者病情的变化的有效手段，具有很强的实用性。

【关键词】 肝炎病毒，乙型；DNA，环状；聚合酶链式反应；单核细胞

【中图分类号】R51216 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2015）02-0048-02

乙型肝炎病毒（HBV）复制有其独特的地方，首先形成共价闭合环DNA（covlently closed circular DNA，cccDNA），然后转录成前基因组RNA，最后在逆转录酶的作用下合成病毒基因组DNA，故cccDNA是HBV复制的突出标志[1]。cccDNA主要存在宿主的细胞核，既往均采用肝组织检测DNA，但取材困难，限制了临床应用。研究发现外周血淋巴细胞同样存在HBV感染复制现象[2，3]，故检测外周血HBV cccDNA同样能反映HBV复制状况及评价药物疗效，且比肝组织更方便，只是外周血cccDNA浓度较低，易出现假阴性。为了评估巢式-实时荧光定量PCR法在检测慢性乙型肝炎患者PBMC中HVB cccDNA的实用性，笔者拟利用巢式-实时荧光定量PCR法同时检测慢性乙肝患者肝组织和PBMC中HVB cccDNA的含量，以期为临床检测HCV复制状况及评价药物疗效提供简便有效的方法。

1 材料与方法

1.1 标本 选取长沙市第一医院传染科确诊的慢性乙型肝炎患者20例，男13例，女7例，平均年龄46.8岁（28～65岁），所有患者均未进行任何治疗。……